PRRSV特异性肽对PRRS免疫猪外周血淋巴细胞IL-12分泌的影响

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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引发的以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难的高度传染性烈性疾病。该病毒能够引起机体免疫抑制,引发混合感染,对养猪业造成巨大损失。猪只感染PRRSV一周后集体会出现特异性的体液免疫,在感染PRRSV两周到四周时可以在猪只血清检测到中和抗体。白细胞介素12(IL-12)在机体细胞免疫反应中是一种重要的白细胞调节因子,是一个多功能的免疫调节因子。本课题前期实验已证实猪只免疫PRRSV弱毒苗或者用PRRSV多肽刺激,经过一段时间机体内IL-12含量会有所上升,使猪只免疫能力增强。本研究通过实验研究分析蓝耳免疫猪在PRRSV特异性肽刺激下IL-12分泌特点,初步了解PRRSV免疫外周血淋巴细胞对IL-12的分泌特点,探讨合理的临床免疫方案。建立蓝耳免疫猪模型,通过ELISA方法测定猪只外周血淋巴细胞产生白细胞介素12的情况,使用PRRSV特异性肽对外周血淋巴细胞进行刺激,测定白细胞介素12的变化。实验结果显示,在PRRSV-GP5aa100-108肽和PRRSV-GP5aa96-104肽刺激淋巴细胞,其IL-12的分泌含量均比对照组分泌量减少。但随着PRRS免疫时间的延长,PRRSV-GP5特异肽对外周血淋巴细胞分泌IL-12量会有所上升,但总体趋势显示分泌量减少。说明PRRSV-GP5特异性肽抑制外周血淋巴细胞对IL-12的分泌。用PRRSV-N106-114肽在不同时间点刺激PRRS免疫14d时外周血淋巴细胞其IL-12的分泌水平,高抗体组下降,低抗体组增高。说明PRRSV-N106-114特异性肽在PRRS免疫早期免疫良好时,抑制外周血淋巴细胞对IL-12的分泌,免疫不良时会促进外周血淋巴细胞分泌IL-12。用PRRSV-N106-114肽在不同时间点刺激PRRS免疫28d时外周血淋巴细胞其IL-12的分泌水平高抗体组为促进作用,抵抗体组为抑制作用,说明PRRS免疫良好时,随着机体抵抗力水平的上升,抗体含量增加,PRRSV-N106-114肽会促进外周血淋巴细胞对IL-12的分泌,反之,PRRS免疫不良时PRRSV-N106-114肽会抑制外周血淋巴细胞对IL-12的分泌。用PRRSV-N49-57肽在不同时间点刺激PRRS免疫14d时外周血淋巴细胞其IL-12的分泌水平高抗体组为先促进后抑制作用,低抗体组分泌水平差异不明显。表明在PRRS免疫初期,PRRSV-N49-57肽会抑制外周血淋巴细胞分泌IL-12。用PRRSV-N49-57肽在不同时间点刺激PRRS免疫28d时外周血淋巴细胞其IL-12的分泌水平高抗体组为先促进后抑制作用,低抗体组均为抑制作用。表明PRRSV免疫确切时,用PRRSV-N49-57肽会短期内促进外周血淋巴细胞对IL-12的分泌,随后表现为抑制状态,PRRSV免疫不确切时会表现为抑制状态。以上结果提示我们,PRRSV免疫状态会对淋巴细胞对IL-12分泌含量有影响。PRRSV特异肽对PRRS的免疫疫苗研制及预防PRRSV感染猪只具有很大的研究价值,在PRRSV免疫不同时间、不同免疫水平、不同多肽刺激、不同的免疫方案机体的免疫水平有差异。IL-12在PRRS免疫中起双向调节作用,IL-12与细胞机能的关系,PRRSV多肽如何影响机体免疫机理还待遇进一步研究。
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