肾舒康对大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

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目的:据我国流行病学调查结果显示,在原发性肾小球疾病中,原发性肾小球肾炎的发生率为76.8%~81.7%,其中MsPGN约占29.7%~59.6%,为导致肾衰的主要原因之一。目前该病多采用激素类、免疫抑制剂等药物进行治疗,但其有明显的毒副作用,因此寻找疗效可靠、毒副作用较小的治疗药物对肾脏疾病的治疗有重要的意义。通过多途径、多靶点实现治疗效应的中药复方在此方面具有一定优势。中药复方肾舒康(SSK)是我们根据慢性肾小球肾炎的发病特点研制的且临床疗效较为肯定的经验方。本研究通过建立改良的慢性血清病系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)动物模型,应用SSK对该模型进行干预性治疗,通过观察MsPGN大鼠模型蛋白尿、血浆蛋白、血脂、肾功能和肾脏病理形态学以及肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的变化,明确肾舒康干预系膜增生性肾小球肾炎的作用,探讨其发挥作用的可能机理,为肾舒康的深层次开发利用提供实验研究依据。方法:选用SD大鼠(雄性,体重150±20g)38只,按体重随机分为正常组(8只)、模型组(10只)、肾舒康组(10只)、雷公藤多苷组(10只),除正常组外,其他三组均采用免疫学方法复制系膜增生性肾小球肾炎模型,应用三氯乙酸法测定各组大鼠24h尿蛋白的含量,全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr),光镜、电镜下观察各组大鼠肾小球系膜区情况及肾小球系膜细胞(GMC)和细胞外基质(ECM)积聚变化,采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织TNF-α蛋白的表达,并用病理图像分析系统对肾组织常规病理及免疫组织化学染色结果进行半定量分析。结果:(1)24h尿蛋白定量实验第2、4周末各组均未出现明显尿蛋白;实验第6、8、12周末除正常组外,其他三组均出现蛋白尿,与正常组相比均有非常显著性差异(P<0.01);肾舒康组与雷公藤多苷组第6周末尿蛋白定量与模型组相比虽有下降,但无显著差异(P>0.05);第8周末两治疗组尿蛋白显著下降,与模型组相比有显著差异(P<0.05);第12周末两治疗组尿蛋白与模型组相比,出现非常显著性差异(P<0.01),肾舒康组与雷公藤多苷组相比,虽然肾舒康组在第6、8、12周尿蛋白均略高于雷公藤多苷组,但无统计学意义(P>0.05)。(2)实验第12周末各组生化检测模型组血清TP、Alb较正常组明显降低(P<0.01);两治疗组血清TP、Alb与模型组相比明显升高(P<0.01);两治疗组相比,肾舒康组血清TP、Alb稍低于雷公藤多苷组,但无显著性差异(P>0.05)。模型组与正常组相比,血清TC、TG、LDL均明显增高(P<0.01),HDL则明显降低(P<0.01);两治疗组与模型组相比,血清TC、TG、LDL明显降低(P<0.01),而HDL则显著升高(P<0.01);两治疗组相比无显著性差异(P>0.05)。模型组血清BUN、Scr与正常组相比显著升高(P<0.01);两治疗组与模型组相比,血清BUN、Scr明显降低(P<0.01);两治疗组相比,肾舒康组血清BUN、Scr虽略高于雷公藤多苷组,但无显著差异(P>0.05)。(3)肾组织病理形态学观察模型组与正常组相比,肾小球系膜细胞(MC)明显增殖(P<0.01),系膜区明显增宽、基质增多、毛细血管受压变窄或消失、系膜基质指数显著升高(P<0.01);两个治疗组与模型组相比,上述病理改变明显减轻,系膜细胞显著减少(P<0.01),系膜基质指数显著下降(P<0.01);两治疗组相比,系膜基质指数无显著差异(P>0.05)。(4)肾组织中TNF-α免疫组化结果模型组肾小球及肾小管TNF-α的相对含量及积分光密度均明显高于正常组(P<0.01);两个治疗组与模型组比较TNF-α的表达明显下降(P<0.01);其中,肾舒康组TNF-α表达的下降幅度与雷公藤多苷组相比无统计学意义(P>0.05)。结论:1肾舒康可以减少MsPGN大鼠尿蛋白、提高血浆蛋白,改善脂代谢,降低BUN、Scr,改善肾组织病理形态学损伤,具有保护肾功能的作用。2肾舒康能抑制MsPGN大鼠系膜细胞的增殖,减少系膜基质的积聚,延缓MsPGN的病理进展,其作用可能与其能够下调肾小球TNF-α表达有关。3肾舒康对MsPGN大鼠模型的干预作用与雷公藤多苷基本相同。
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