人参茎叶三醇组皂苷酶解产物(GTEH)抗阿尔茨海默症作用研究

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阿尔茨海默症(AD)是一种起病隐匿并伴有认知、行为和功能异常的进行性神经系统退行性疾病,多65岁以上发病,是一种严重危害老年人身体健康的疾病。AD病因十分复杂,目前已成为全球医学界研究重点。目前临床上治疗AD的有效药物仍旧缺乏,大多为西药,但西药副作用较大,易产生耐药性且价格比较昂贵,而中草药具有多靶点、不良反应少、作用温和、价格低等特点,逐渐被用于预防和治疗AD,如人参皂苷、熟地黄、银杏叶等均可从不同角度防治AD。
  人参为五加科多年生草本植物,是我国传统的名贵药材,素有“百草之王”称号,具有悠久的药用历史和广泛的药理作用,其药理作用主要表现在对中枢神经系统的刺激和抑制、对免疫系统的调节作用、对心血管系统的改善作用和抗肿瘤作用等。人参皂苷是人参中的主要活性成分,近年来研究发现人参皂苷具有显著的抗AD作用,如人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Re和Rd,具有广阔的发展前景。人参茎叶为人参副产物,含有大量皂苷类成分,人参茎叶三醇组皂苷酶解产物(GTEH)是否具有抗AD作用至今尚未见报道。
  本研究采用跳台及Y迷宫行为学实验,首先检测了GTEH对东莨菪碱所致的小鼠记忆获得障碍模型、亚硝酸钠引起的记忆巩固障碍小鼠模型以及40%乙醇造成的记忆再现障碍小鼠模型的影响。选用盐酸多奈哌齐为阳性对照药物,采用ELISA方法检测了小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,并检测了血浆纤维蛋白原(Fib)含量,初步探讨GTEH对学习记忆障碍小鼠的学习记忆能力改善的作用机制。同时进一步考查了GTEH对三氯化铝联合D-半乳糖联合给药诱导小鼠AD模型的作用,采用跳台实验测定小鼠学习记忆能力的变化,采用ELISA方法检测小鼠海马中乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、磷酸化Tau蛋白(P-Tau)活性和乙酰胆碱(ACH)的含量,采用病理学组织切片检测小鼠海马组织的变化,采用免疫组化法检测小鼠海马组织内Tau蛋白、(细胞周期素依赖蛋白激酶5)CDK5、(微管相关蛋白)MAP2、(核因子-b亚基p65亲和肽)NF-κBp65和(β-淀粉样蛋白)Aβ蛋白的表达情况,以期从胆碱能、抗氧化、病理学和免疫组织化学等方面探讨GTEH对AD小鼠的作用机制。
  结果:GTEH能改善化学药物造成小鼠学习记忆的损伤,对AD小鼠的认知能力及病理变化也具有改善作用;GTEH可提高三氯化铝/D-半乳糖诱导的AD小鼠的学习记忆能力,抑制小鼠海马中AChE和P-Tau活性,提高GSH-PX活性和Ach含量,可抑制小鼠海马内Tau、CDK5、NF-κBp65和Aβ蛋白的表达,同时促进MAP2的表达。
  结论:GTEH对化学药物造成的小鼠学习记忆损伤的改善作用可能与其改善胆碱能系统、抗氧化及血液流变学有关;GTEH对由三氯化铝/D-半乳糖联合给药诱导的AD模型小鼠具有治疗作用,其机制可能与抑制Aβ蛋白沉积、抑制Tau蛋白过度磷酸化,增加GSH-Px的活性,减少炎症因子NF-κBp65的表达有关。
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