成人肝圆韧带内皮细胞的分布及功能的研究

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[摘要]目的探讨成人肝圆韧带内皮细胞的分布和功能,为临床上应用肝圆韧带修复重建门静脉肠系膜上静脉提供理论依据。方法腹部手术时切除的肝圆韧带42例,随机选取12例,自裂隙段至腱膜下段连续取材;其余30例分别在裂隙段、游离段、腱膜下段的中点取材,作为研究组。腹部手术时切除的腹部大静脉包括门静脉、脾静脉、肾静脉20例,作为对照组。将两组标本制成石蜡切片,进行HE染色,光镜下观察肝圆韧带的残腔形态及内皮细胞的分布。HE染色观察到内皮细胞的裂隙段肝圆韧带及静脉,分别行Ⅷ因子相关抗原(Factor Ⅷ-related antigen, FVⅧRAg)、CD34分子、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)、组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator, t-PA)免疫组化染色,高倍镜下拍片,利用IPP图像分析软件进行图像分析,得出平均光密度(average optical density, AOD)。对两组资料的AOD值进行比较。结果1.HE染色光镜下观察可见:肝圆韧带各段均存在不同形状的残腔,残腔形态有椭圆形、扁窄形及星形。2.肝圆韧带各段残腔内可见内皮细胞,12例连续取材标本观察,内皮细胞数目自裂隙段至腱膜下段呈减少趋势;42例标本的裂隙段、游离段和腱膜下段每高倍镜视野下内皮细胞数目的中位数分别是:15个、11个、4.5个,经统计学分析,裂隙段和游离段内皮细胞数目明显高于腱膜下段(P<0.05),裂隙段和游离段无显著差异(P>0.05)。3.FⅧRAg、CD34分子免疫组化染色:阳性标本的残腔内膜可见棕黄色染色,阴性标本的残腔内膜无棕黄色染色。实验组与对照组FⅧRAg、CD34分子免疫组化染色的AOD差异均无统计学意义(P>0.05)。4. eNOS、t-PA免疫组化染色:阳性标本的残腔内膜可见棕黄色染色,阴性标本的残腔内膜无棕黄色。实验组与对照组eNOS、t-PA免疫组化染色的AOD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.肝圆韧带各段均存在不同形态的残腔,各段残腔内可见内皮细胞。裂隙段和游离段内皮细胞数目明显高于腱膜下段,裂隙段和游离段无差异。临床应用肝圆韧带代替门静脉肠系膜上静脉应尽量利用裂隙段和游离段。2.肝圆韧带内皮细胞能够合成FⅧRAg、CD34、eNOS及t-PA,其功能与正常腹部大静脉相似。3.肝圆韧带内皮细胞能够合成eNOS、t-PA,具有一定的预防血栓形成作用。
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