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肺炎克雷伯菌是肠杆菌科一种重要的条件致病菌,随着抗生素的广泛滥用,肺炎克雷伯菌已经成为医院感染的最常见的病原菌之一。肺炎克雷伯菌在抗生素压力下产生超广谱β-内酰酶(ESBIS)导致多重耐药菌株的出现。
第一部分,目的:了解山西地区五家三甲医院多重耐药的肺炎克雷伯菌的临床科室分布和耐药特点,研究山西地区部分医院产ESBLs的多重耐药的肺炎克雷伯菌氟喹诺酮类的相关基因的流行情况。
方法:收集山西地区五家三甲医院2010年1月至2010年12月多重耐药的肺炎克雷伯菌进行药敏试验,依据CLSI推荐标准方法Kirby-Bauer法(K-B法),使用WHONET5.5软件完成数据分析。采用PCR法扩增产ESBLs的多重耐药的肺炎克雷伯菌相关基因,选取阳性产物进行测序并在Genbank分析结果。
结果:2010年医院临床标本中分离肺炎克雷伯菌2516株,其中分离多重耐药的肺炎克雷伯菌40株,40株多重耐药菌株主要分布在呼吸内科、神经内科和ICU,且以痰标本阳性率最高(31株,占77.5%);多重耐药的肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率最低为12.5%,头孢西丁、阿米卡星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、头孢他啶耐药率分别为60%、65.0%、67.5%、75%、77.5%、77.5%、其它的抗菌药物的耐药率都大于82.5%。
根据ESBLs确证实验,40株多重耐药的肺炎克雷伯菌全部为产超广谱β-内酰酶的菌株,喹诺酮类的环丙沙星耐药率为77.5%,PCR法检测出染色体介导的GyrA的32株,其中2株对环丙沙星敏感。质粒介导的qnr基因共检测出8株blaqnrA1和15株blaqnB4。
碳青霉烯类亚胺培南耐药率为12.5%,用改良的Hodge实验检出4株KPC酶,PCR法基因检测出4株KPC型,没有检出金属酶NDM-1基因。
结论:肺炎克雷伯菌是引起医院感染的重要致病菌,抗生素的广泛应用导致耐药菌株呈不断上升趋势,泛耐药和多重耐药的菌株出现导致同一菌株中同时携带几种基因。
多重耐药肺炎克雷伯菌现象较严重,耐药机制非常复杂,应加强临床病例的监测,合理使用抗菌药物,减少耐药菌株的传播。
第二部分,目的:研究肺炎克雷伯菌的主要耐药机制。肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶的耐药机制;外膜蛋白的缺失和靶位的改变;生物膜的耐药机制;外排泵机制耐药作用。结果:临床上应依据细菌的药敏结果,及时控制感染,同时应加强对肺炎克雷伯菌的耐药性监测,合理使用抗生素物,有效预防和控制耐药菌株的扩散和传播。