黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁,AFB₁）是黄曲霉毒素中毒性最强的一种霉菌毒素,具有较强的“三致”作用,其主要由寄生曲霉菌和黄曲霉菌产生。硒（Selenium,Se）是人类和动物重要的微量元素之一,其具有较好的抗氧化和解毒功能。我们前期的研究显示AFB₁污染的日粮饲喂雏鸡能诱导法氏囊（Bursa of Fabricius,BF）细胞周期阻滞在G₂M期。特别地,在日粮中添加Se之后,可以较好的缓解AFB₁在BF诱导的组织损伤,从而改善体液免疫功能。然而,关于AFB₁对雏鸡BF细胞周期阻滞以及硒对其保护作用的分子机理还未见报道。本研究以肉雏鸡为研究对象,用组织病理学、流式细胞术和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和生物化学方法,研究AFB₁诱导BF组织损伤和细胞周期阻滞的分子机理以及Se在其中的保护作用。试验选用1日龄科宝肉鸡健雏288只,随机分为4组,每组包含3个重复,每个重复24只,分别用对照组日粮（基础日粮）、+Se组日粮（硒添加量0.4 mg/kg）、AFB₁组日粮（AFB₁添加量0.6 mg/kg AFB₁）和AFB₁+Se组日粮（硒和AFB₁添加量分别为0.4 mg/kg和0.6 mg/kg）,饲喂21天。其结果如下:组织病理学观察显示,与对照组相比,AFB₁组雏鸡法氏囊脏器指数降低,组织病理学变化表现为淋巴滤泡皮质区和髓质区细胞核碎片增多和空洞形成;+Se组和AFB₁+Se组则未见明显病理变化。生化试剂盒检测抗氧化指标显示,从7日龄到21日龄,AFB₁组雏鸡法氏囊组织中抗氧化酶GR,GSH-Px,CAT,SOD的活力,羟自由基清除能力和GSH的含量与对照组相比呈极显著或显著下降（p<0.01或p<0.05）,但脂质过氧化产物MDA的水平是极显著或显著升高的（p<0.05或p<0.01）。在补充日粮Se之后,抗氧化酶GR,GSH-Px,CAT,SOD的活力,羟自由基清除能力和GSH的含量与AFB₁组相比较呈极显著或显著上升（p<0.01或p<0.05）,MDA的水平呈极显著下降（p<0.01）。然而,这些抗氧化标志物在对照组、+Se组和AFB₁+Se组之间并没有显著的变化趋势被发现（p>0.05）。以上结果表明:日粮中添加0.4 mg/kg的Se能够缓解AFB₁诱导的氧化损伤,从而改善AFB₁导致的病理损伤。流式细胞术检测结果显示,在7日龄,AFB₁组G₀G₁期细胞百分比与对照组相比是极显著降低的（p<0.01）,在14和21日龄极显著增加（p<0.01）;AFB₁组G₂M期细胞百分比在7日粮与对照组相比极显著增加（p<0.01）,在14日龄极显著减少（p<0.01）。重要的是,从7日龄至21日龄,以上参数在对照组,+Se组和AFB₁+Se之间并没有表现出明显的差异（p>0.05）。该研究结果显示0.6 mg/kg AFB₁可能诱导雏鸡法氏囊细胞周期在7日龄阻滞在G₂M期,在14和21日龄阻滞在G₀G₁期。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,在7日龄AFB₁诱导了ATM和Chk2mRNA表达量增加（p<0.01或p<0.05）,cdc25 mRNA表达量和cyclin B₃/cdc2复合物水平降低（p<0.01或p<0.05）。在14和21日龄AFB₁能诱导ATM,Chk2和p21 mRNA表达量增加（p<0.01或p<0.05）,p53和cyclin D₁/CDK6复合物的mRNA表达量减少（p<0.01或p<0.05）。有趣的是,在14和21日龄,AFB₁组cdc25的mRNA表达量也是减少的（p<0.01或p<0.05）。重要的是,以上指标在AFB₁+Se组的表达量均接近于对照组,且+Se组中这些指标与对照组相比也无差异（p>0.05）。以上试验结果表明日粮中添加0.4 mg/kg硒缓解0.6 mg/kg AFB₁诱导的细胞周期阻滞,其在G₂M期可能通过ATM-Chk2-cdc25-cyclin B₃/cdc2途径,在G₀G₁期可能通过ATM-Chk2-cdc25-cyclin D₁/CDK6和ATM-Chk2-p21--cyclin D₁/CDK6两个途径。综上,日粮中添加0.4 mg/kg硒具有较好的抗氧化作用,从而缓解0.6 mg/kg AFB₁在BF诱导的组织损伤。此外,硒可能通过激活ATM-Chk2-cdc25-cyclin B₃/cdc2通路来保护AFB₁在7日龄诱导的BF细胞G₂M期阻滞,通过激活ATM-Chk2-cdc25-cyclin D₁/CDK6途径和ATM-Chk2-p21-cyclin D₁/CDK6途径缓解AFB₁在14和21日龄诱导的BF细胞G₀G₁期阻滞。该研究提示Se可以作为一种潜在的抗氧化剂添加在日粮中,具有缓解AFB₁毒性的功能。