海南岛不同地区海马齿遗传多样性分析及耐盐种质资源初步筛选

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海马齿(Sesuvium portulacastrum L.)是一种多年生肉质草本植物,它对盐离子具有极强的耐受性。本研究首先从海南环岛16个地区采集到野生海马齿资源,并运用随机扩增多型性DNA(RAPD,Random Amplified Polymorphic DNA)技术分析了海南岛海马齿种质资源的遗传多样性,进而展开了形态学和生理生化特性比较测定,分析耐盐性与海马齿植株中Na+、K+含量之间的关系,得到耐盐性差异结果,获得了耐盐性更强的海马齿种植资源,为进一步开发利用海马齿耐盐基因提供了重要的研究材料。本研究的主要内容有:1、海南岛野生海马齿地理分布与生境分析沿海南岛东线和西线进行5次环岛采样,从海南岛11个市县收集到16个代表性地方的野生海马齿种质材料,其主要位于海南本岛的18°14′~20°05′N和108°39′~110°59′E区域内,主要分布在平均海拔7.4 m左右海陆交汇处的沙滩上。另外,观察到海马齿的主要伴生植物共计27种。2、海马齿种质资RAPD分子标记遗传多样性分析以海南岛收集到的16个海马齿野生资源为实验材料,采用RAPD分子标记技术,研究海南岛海马齿遗传多样性,以期为海马齿资源的保护及利用提供参考依据。通过设计的28条RAPD引物,成功扩增出131条清晰条带,发现多态性条带比率占总条带的59.54%,平均每个引物可扩增8.1个DNA条带。通过NTSYS软件对16份材料进行遗传相似系数及遗传距离的计算,平均遗传相似系数为0.8711,遗传相似系数在0.8122~0.9429之间,遗传距离在0.0588~0.2079之间,遗传系数为0.868处可将材料聚为三大类。结果表明,供试海马齿材料之间相似性较高,遗传距离较近,这可能是采集材料地理分布较近或海南岛整体地域生态环境气候差异不大的原因。3、海南岛海马齿种质资源耐盐性研究选择600 mmol/L Na Cl高盐处理溶液作为不同地区海马齿耐盐性鉴定的盐胁迫筛选溶度,利用形态测量、相对含水量、叶绿素含量、脯氨酸、可溶性糖、丙二醛为衡量指标,对16个地区来源的野生海马齿种质资源进行耐盐性差异分析,并运用主成分分析方法对这些海马齿的耐盐性进行了综合评估,发现海口市江南城和文昌市清澜港两处的海马齿耐盐性较强,而从儋州市洋浦新英湾和陵水黎族自治县盐尽村两处获得的海马齿的耐盐性较弱。对筛选出的上述4个地区的海马齿处理后的叶片进行扫描电镜能谱分析(SEM-EDS),测定比较钠钾离子含量,发现盐胁迫后,耐盐品系海马齿叶片中均积累了更高的Na+、Cl-,而K+百分含量降低,表明钠钾比值的高低是海马齿的耐盐性强弱的重要参考指标。这是首次对海南岛野生海马齿种质资源进行系统性调查搜集和耐盐性比较评估,研究结果可为后续研究海马齿耐盐机理和挖掘优良耐盐基因提供宝贵的实验材料及一定的理论基础。
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