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目的：运用基因芯片技术筛选喉鳞状细胞癌中miRNA表达变化及其作用机制。方法：利用基因芯片技术筛选喉鳞状细胞癌组织与癌旁正常喉上皮组织miRNA和mRNA表达水平的差异,同时对mRNA表达谱进行了聚类分析,并运用半定量RT-PCR方法进行验证,在此基础上结合生物信息学对miRNA的可能靶基因进行预测,随后再使用反义寡核苷酸技术特异性抑制喉癌细胞系HEp-2细胞内miRNA的功能,分别运用半定量RT-PCR,Western blot验证靶基因mRNA和蛋白水平的变化,并通过构建EGFP报告载体的方法进行靶基因的验证。最后利用MTT法、软琼脂克隆形成实验及细胞周期分析miRNA-21对肿瘤细胞活性和增殖能力的影响。利用细胞聚集实验,划痕实验和Transwell迁移实验分析miR-16对细胞粘附和运动能力的影响。结果：本研究筛选出在喉癌组织中差异表达的miRNA共13个,明显上调的miRNA为6个,明显下调的miRNA为7个。而mRNA表达谱筛选出差异表达的基因90个,上调基因为29个,下调基因为61个。发现ASO-21能够增加BTG2的mRNA水平。此外,ASO-21能够明显缓解miRNA对EGFP(?)报告载体中EGFP表达抑制,确定了BTG2是miR-21的靶基因。同时发现,ASO-21能够使HEp-2肿瘤细胞的活性和增殖能力均明显下降,使细胞停滞于G1期,减少向S期转化。同样,ASO-16能够增加ZYXIN的mRNA水平,蛋白表达水平,其也能够明显缓解miRNA-16对EGFP报告载体中EGFP表达抑制,确定了ZYXIN是miR-16的靶基因。同时发现,ASO-16能够使HEp-2肿瘤细胞之间粘附性增强,运动能力减弱。结论：本文运用芯片技术筛选出了喉鳞状细胞癌组织与癌旁正常喉上皮组织miRNA和mRNA表达水平的差异,结合生物信息学预测了miR-21/miR-16的靶基因。通过实验证实了miR-21可以通过调控靶基因BTG2的表达而促进喉癌细胞增殖能力。miR-16可以通过调控靶基因ZYXIN的表达而抑制喉癌细胞的黏附性,增强肿瘤细胞的迁移、运动能力。该研究显示miRNA与喉癌发生、发展密切相关,对进一步理解喉鳞状细胞癌的发生发展机制具有重要意义。