miR-181a调控上皮间质转化影响食管癌细胞的增殖迁移及凋亡

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目的:研究miR-181a的表达水平对食管鳞癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响,探讨miR-181a通过TGFβ/Smad通路调控食管鳞状细胞癌上皮间质转化发生的机制。方法:培养TE-1、ECA109食管鳞癌细胞,将其分为四个组,分别为 miRNA-181a mimics 处理组、mimics negative control(mimics N.C)、miR-181a inhibitor 处理组、inhibitor negative control(inhibitor N.C)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测转染后TE-1、ECA109细胞miR-181 a和 TGFβ1、Smad4、E-cadherin、Vimentin 的 mRNA 表达水平;采用 Western blot(WB)检测 TGFβ1、Smad4、E-cadherin、Vimentin 的蛋白表达水平;采用CCK-8、划痕实验和流式细胞术检测细胞的增殖、迁移和凋亡能力的变化。结果:与阴性对照组相比,mimics组中TE-1和ECA109细胞的miR-181a相对表达量均升高(P<0.05),inhibitor组中miR-181a相对表达量均降低(P<0.05);RT-qPCR和Western blot结果显示,与阴性对照组相比mimics组中TGFβ1、Vimentin的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),Smad4、E-cadherin 的 mRNA 和蛋白表达水平均降低(P<0.05);CCK-8和划痕实验显示,与阴性对照组比较,mimics组细胞增殖和迁移能力增强,inhibitor组细胞增殖和迁移能力降低(P<0.05);流式细胞术结果显示,与阴性对照组比较,mimics组的细胞总凋亡率降低,inhibitor组的细胞总凋亡率升高(P<0.05)。结论:miR-181a可能通过调控Smad4影响TGFβ/Smad通路来促进食管鳞癌细胞的上皮间质转化,从而影响其增殖、迁移和凋亡能力。
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