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背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是导致老年痴呆的主要原因,随年龄的增长患病率逐年增加,患者早期表现为近事记忆的减退,随着病情进展,大脑功能严重损害,出现定向力障碍、思维障碍等,逐渐出现人格的改变、行为异常、情感障碍及精神症状,直至自理能力完全丧失。不仅严重影响患者自身健康,也给家庭、社会均带来沉重的经济负担。现代医学以药物治疗、改善症状为主,至今尚无可有效根治的药物。传统医学认为阿尔茨海默病基本病机为本虚标实,尤以肾虚为根本,“肾不生,则髓不能满”,髓海不充,则脑失所养,进而出现失眠、健忘及智力减退,将其归为“神病”范畴。中医治疗阿尔茨海默病历史悠久,具有综合调治、兼顾预防保健的优势,而针灸作为中医治疗手段在防治阿尔茨海默病方面具有良好的临床疗效,可有效改善患者的认知损伤,提高患者自理能力,但针灸疗效潜在机制的研究越来越引起众多学者的关注。目的:探索电针治疗AD大鼠百会、肾俞穴,能否有效改善AD大鼠的认知损伤,并对其潜在的治疗机制进行研究。方法:SD雄性大鼠,随机分为正常组(n=20),假手术组(n=20),模型组(n=19)和电针组(n=19),采用β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)双侧海马CA1区注射诱导阿尔茨海默病大鼠模型。造模成功后,给予大鼠电针肾俞、百会穴治疗,取连续波,频率2Hz,留针20min,每日1次,连续6日为1疗程,治疗周期为4个疗程。疗程结束后,采用Morris水迷宫进行行为学评价,之后取大鼠双侧海马组织,采用免疫组化(immunohistochemistry)和蛋白印迹(western blot)分别检测β-淀粉样蛋白(beta-aloymid,Aβ)、磷酸化 tau(Hyperphosphorylated tau,p-tau)蛋白、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(peroxisome proliferation activated receptorsγ,PPAR-γ)及磷酸化 p38 丝裂原活化蛋白激酶(hyperphosphorylated p38 mitogen activated protein kinasep,p-p38MAPK),比较各组大鼠的表达情况。结果:分三部分:各组大鼠行为学评价;各组大鼠海马CA1区病理改变及各组大鼠海马CA1区PPAR-y及p-p38MAPK的表达情况。1行为学评价:1.1定位航行实验中,各组大鼠逃避潜伏期(escape latency time,ELT)随训练时间延长而缩短,各组有差异,模型组大鼠所需时间最长,电针治疗后大鼠ELT显著减少(P<0.01);模型组大鼠在实验第1至3天ELT改善明显,但在之后2两天ELT反而有所增加,电针组随训练时间ELT显著减少,趋势平稳(P<0.01)。与正常组相比,模型组寻找平台所用时间最长,逃避潜伏期显著延长,具有统计学意义(P<0.01)。经电针治疗后,AD大鼠的逃避潜伏期显著缩短,并具有统计学意义(P<0.01)。1.2空间探索实验中,正常组与假手术组大鼠寻找平台策略更直接,运动轨迹呈现直线式;而模型组大鼠,运动轨迹主要为边缘化、随机化运动,少数大鼠表现为围绕池壁边缘游泳。经过电针治疗后,电针组较模型组大鼠的运动轨迹表现为趋向性,趋向于向原平台所在象限及周围两侧游泳。与正常组和假手术组比较,模型组大鼠跨越原平台所在象限时间最短,频率最少,具有统计学意义(P<0.01)。经过电针治疗后,AD大鼠跨越原平台所在象限时间显著延长,频率显著增多,具有统计学意义(P<0.01)。2各组海马CA1区病理改变的比较:2.1免疫组化结果显示,模型组可见大量染色Aβ堆积在神经元细胞外,假手术组也可见较多的深棕色Aβ,正常组大鼠海马仅有少量阳性表达,电针治疗后大鼠海马CA1区Aβ表达显著减少,有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马神经细胞胞浆内可见大片深棕色p-tau(Ser404,Thr181)蛋白,表达显著高于正常组和假手术组,电针组大鼠海马p-tau蛋白在神经细胞浆内表达显著减少,有统计学意义(P<0.05)。2.2 Western结果显示,模型组大鼠海马内Aβ表达明显高于正常组,经电针治疗后表达显著减少,有统计学意义(P<0.01),与假手术组无差异(P>0.05)。模型组大鼠海马内p-tauThr181和p-tauSer 404蛋白表达明显高于正常组和假手术组(P<0.05),经电针治疗后表达显著减少,有统计学意义(P<0.01)。3各组大鼠海马CA1区PPAR-γ及磷酸化p38MAPK的比较:3.1免疫组化结果显示,正常组大鼠海马CA1区细胞核内可见大量深染的PPAR-γ,表达显著高于其他组,模型组大鼠海马CA1区PPAR-γ表达最少,电针组大鼠海马CA1区PPAR-γ表达较模型组有所增加,有统计学意义(P<0.05)。正常组大鼠海马CA1区仅有少量染色p-p38MAPK,模型组大鼠海马CA1区有大量染色的p-p38MAPK表达;电针治疗后,大鼠海马CA1区p-p38MAPK表达显著减少,有统计学意义(P<0.05)。3.2 Western结果显示,模型组大鼠海马CA1区PPAR-γ表达显著减少,经电针治疗后,大鼠CA1区PPAR-γ表达增加,有统计学意义(P<0.01)。同时,与正常组和假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区p-p38MAPK过表达,经电针治疗后,大鼠CA1区p-p38MAPK表达显著降低,有统计学意义(P<0.01)。结论:1电针肾俞、百会穴可降低AD大鼠认知功能的损伤,改善大鼠空间定向力、学习记忆能力。2电针肾俞、百会能显著改善AD大鼠海马内的病理改变,减少Aβ聚集,降低tau蛋白过度磷酸化。3电针肾俞、百会能激活PPAR-γ,抑制p38MAPK信号通路的激活,下调阿尔茨海默病大鼠海马CA1区Aβ和p-tau(Ser 404,Thr181)的表达,改善认知功能。