目的 肝肾综合征（HRS）是重症肝病晚期发生的严重并发症，预后很差。尽管此时肾脏发生了严重的功能障碍，却仅有相对轻微的病理损伤。因此普遍认为肾血管收缩引起的肾血流量锐减是HRS发生的主要因素。然而引起HRS肾血管收缩的机制尚未明确。临床研究证明：重症肝炎患者血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平明显升高。因此探讨TNF-α在HRS发病中的作用已日益受到重视。最近在细胞体外培养中发现：TNF-α能增强肾小球前小动脉平滑肌细胞内Ⅰ型1，4，5-三磷酸肌醇受体（IP₃R）蛋白和mR-NA的表达；TNF-α也可增加细胞外Ca²⁺内流。上述机制可促进肾血管收缩，减少肾血流。因目前尚未建立HRS动物模型，故为了排除血浆中其它血管活性物质对血管舒缩活性的干扰影响，本研究应用肾脏离体灌流技术（IPK），体外灌流正常大鼠的离体肾脏，观察用TNF-α预灌流后，肾血管对内皮素（ET）反应性的变化及肾组织中Ⅰ型IP₃R的表达。 材料与方法 实验动物为健康雄性Wistar大鼠，制备离体肾灌注模型后，随机分成6组：30分钟平衡期过后，各组处理如下：1．A组：Kreb’s液灌流90分钟，加ET刺激；2．a组：Kreb’s液灌流90分钟，不加ET刺激；3．B组：含1μg／L TNF-α的Kreb’s液灌流90分钟，加ET刺激；4．b组：含1μg／L TNF-α的Kreb’s液灌流90分钟，不加ET刺激；5．C组：含10mg／L肝素的Kreb’s液灌流90分钟，加ET刺激；6．c组：含10mg／L肝素的Kreb’s液灌流90分钟，不加ET刺激。应用IPK技术，恒量灌流大鼠的离体肾脏，在多导生理记录仪上连续记录肾脏灌注压的改变。灌流结束时，肾标本称重后，立即用4％的多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋。常规HE染色，显微镜观察各组肾脏组织是否有形态改变及器质损伤（如坏死）。对a、b、c三组的石蜡切片标本行免疫组化（过氧化物酶方法），检测Ⅰ型IP₃R蛋白。DAB显色后，有棕褐色颗粒着色的细胞为阳性细胞。结果 1.平衡期过后，将，rNF一a（1林扩L）和肝素（10m扩L）加人灌注液中进行灌流时，灌注压仍保持在基础灌注压水平，无明显改变;而用5卜岁LTNF一仪进行灌流时，基础灌注压曲线呈斜型上升（图3）。 2.A组（对照组），在2 IunoFL ET刺激下，肾灌注压迅速升高，高出基础灌注压47士9^Hg;B组用TNF一创1林扩L)预灌流后，ET刺激，肾灌注压明显升高，高出基础灌注压97*36^Hg（图1、表1）;C组用肝素预灌流后，、ET刺激，肾灌注压仅仅略有升高，高出基础灌注压n土6mmHg（图2、表2）。 3.免疫组化检测I型IP3R:b组与a组相比棕褐色颗粒着色的阳性细胞明显增多;c组与a组相比棕褐色颗粒着色的阳性细胞无明显减少（表3）。结论 1.TNF一。可增强内皮素（ET）的肾血管收缩作用。 2.TNF一。可增强肾小球系膜细胞和血管平滑肌细胞I型IP3R的表达。