肺癌是生长在气管、支气管、细支气管包括肺泡组织的一种恶性肿瘤,目前是全世界发病率和死亡率最高的癌症种属。化疗是肺癌的主要治疗方法之一,90%以上的肺癌需要接受化学药物治疗,其中基于铂类的化学药物治疗是临床的基本方案。但化疗用药后肺癌产生的多药耐药(MDR)却是临床亟待解决的问题。肺癌多药耐药是指肺癌细胞对多种化疗药物产生交叉耐药的现象,也是目前肿瘤化疗失败的重要原因。它分为先天耐药和获得性耐药两种。先天耐药一般是某些癌症特有的能力,与基因有关;而获得性耐药是指癌症本身不耐药,但经药物治疗后获得的抗药性。它与很多因素有关,比如:MRP、P53、谷胱甘肽转移酶、细胞凋亡异常等等。其中穹隆体主蛋白(MVP),又称肺耐药相关蛋白(LRP),在肿瘤获得性耐药中发挥了重要作用。它是穹窿体的主要构成蛋白,主要介导核膜转运功能,是肿瘤细胞耐受铂类药物的重要因素之一。IL-25,又称IL-17E,是IL-17家族成员之一,在调节过敏和Th2型反应中具有独特功能。目前发现IL-25的主要来源包括上皮细胞、髓细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞以及肥大细胞。它能诱导一些淋巴细胞分泌Th2型细胞因子,促进Th2型反应。此外,它在过敏性肺病,宿主抵御寄生虫方面也有重要作用。近年来有研究表明IL-25在肿瘤治疗中发挥着重要作用,但它与肺癌多药耐药的关系却未有研究。在本文中,我们发现IL-25与肺腺癌细胞顺铂耐药存在一定的联系,并对其存在的机制做了一部分研究,具体结果如下:1.A549与A549/CDDP耐药株存在明显差异为了探究肺腺癌细胞化疗耐药机制,我们成功构建了肺腺癌细胞A549顺铂耐药株A549/CDDP。虽然同为肺腺癌细胞株,但两者存在明显的差异。在形态方面,相比于亲本株的不规则型,耐药株普遍表现为长梭型结构,类似于成纤维细胞。另外,耐药株比亲本株拥有更强的侵袭能力,能在更高的顺铂浓度下生存,同时耐药相关蛋白MVP也表达明显升高。2.IL-25在耐药株中异常表达并参与了顺铂耐药的形成介于IL-25是一种分泌性蛋白,我们分别检测了IL-25在A549和A549/CDDP胞内胞外的表达。结果表明,IL-25在耐药细胞株胞内外表达都比亲本株高。随后,我们分别在亲本细胞株中过表达IL-25,在耐药细胞株中沉默IL-25,结果发现IL-25的过表达增强了A549的耐药能力,而沉默IL-25降低了A549/CDDP的耐药能力。这些现象说明IL-25与肺腺癌细胞的顺铂耐药有关,且它的表达提高了肺腺癌细胞A549的顺铂耐药。3.IL-25通过NF-κB信号通路介导MVP的表达为进一步探究IL-25增强肺腺癌细胞A549顺铂耐药的机制,我们检测了过表达IL-25的A549以及沉默IL-25的A549/CDDP细胞中MVP的表达。结果发现,过表达组表现了更高水平的MVP表达量,而沉默组表现了低水平的MVP表达。此外,外加不同浓度IL-25刺激A549细胞,MVP的表达也有逐渐增强的趋势。这些结果表明IL-25促进了MVP的表达。随后,我们分别检测了IL-25过表达组,IL-25沉默组NF-κB信号通路的激活情况。结果表明,IL-25的过表达或沉默导致了NF-κB信号通路的激活或抑制。另外,给予外源IL-25刺激A549细胞,NF-κB信号通路也被激活,且随着IL-25外加的浓度呈梯度上升趋势。进一步实验表明在A549细胞中运用NF-κB信号通路阻断剂QNZ阻断后,能够明显抑制外源IL-25诱导的MVP上调。这些现象说明IL-25调控MVP的表达的确是通过激活NF-κB信号通路发挥作用的,如果干扰NF-κB通路,IL-25增强MVP表达的功能丧失。4.IL-25在裸鼠荷瘤模型中抵抗顺铂治疗效果体外实验表明IL-25能协助肺腺癌细胞A549抵抗顺铂的杀伤作用进而继续生存。为探究IL-25在体内是否具有相同效果,我们建立了裸鼠荷瘤模型,分别给予顺铂、顺铂联合IL-25癌旁注射治疗,观察小鼠肿瘤的生长情况,随后对肿瘤样本进行了组织学分析。结果表明:IL-25的存在干扰了顺铂治疗肿瘤的效果。且组织学分析发现,IL-25组的肿瘤组织高表达MVP。这些结果说明IL-25在体内也发挥着协助肿瘤逃逸化疗效果的作用。