论文部分内容阅读
目的：本实验利用柱层析方法分离纯化荔枝核中皂苷类成份，建立大孔吸附树脂分离纯化荔枝核皂苷的试验方法，并建立了荔枝核皂苷准确可靠的含量测定方法。初步确定荔枝核皂苷标准提取物质量标准，然后对荔枝核抗肿瘤成分进行了初步药理试验筛选研究。
方法：以人参皂苷Rg<,1>为对照品，采用香草醛—高氯酸比色法，应用723分光光度计确定荔枝核皂苷含量测定的实验条件；采用L9(4<3>)正交实验设计，以荔枝核总皂苷的含量为指标，考察乙醇用量、回流时间、回流次数、乙醇浓度四个因素对荔枝核总皂苷提取率的影响，确定最佳提取工艺，以此为提取条件进行总皂苷的提取；考察D-101大孔吸附树脂对荔枝核总皂苷的吸附和洗脱条件，确定荔枝核皂苷分离纯化条件，并采用分光光度法测定提取物中荔枝核皂苷的含量；建立荔枝核皂苷标准提取物质量标准。将HepA肝癌实体瘤模型小鼠分成阴性对照组(空白组))、阳性对照组(环磷酰胺)、总皂苷大、中、小剂量治疗组，以瘤重抑制率为指标，考察荔枝核皂苷抗肿瘤药效；将按纯化条件得到总皂苷类成分，通过硅胶柱层析进行分离。
结果：应用比色法建立了荔枝核皂苷含量测定的实验条件，得到标准曲线为A=26.8676C-0.02699(r=0.9985)，线性范围为10～240ugl D-101大孔吸附树脂可以将荔枝核总皂苷含量由浸膏中的6.04﹪提高至44.1﹪；荔枝核皂苷最佳提取工艺为6倍量乙醇，回流3次，每次回流2小时，乙醇浓度为70﹪；拟订了荔枝核皂苷标准提取物质量标准草案。实体瘤模型小鼠的阳性对照组(环磷酰胺)、总皂苷大、中、小剂量治疗组的瘤重抑制率分别为59.12﹪、32.59﹪、30.46﹪、28.40﹪。实体瘤模型小鼠提取物治疗组和总皂苷治疗组与阴性对照组，均有显著性差异。
结论：本课题对荔枝核总皂苷提取纯化和含量测定方法进行了细致的研究，并建立了荔枝核皂苷标准提取物质量标准。发现总皂苷的瘤重抑制率约30﹪，经统计学处理与阴性对照组有显著差异，认为荔枝核皂苷有一定抗肿瘤疗效。