【摘 要】
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青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk)系胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属(Cyclocarya)植物,常生长在海拔500至2500米的多云多雾的森林之中,现仅存于中国南方。青钱柳具有降血糖、降血压、抗氧化和增强机体免疫功能等作用,被誉为“医学界的第三棵树”。目前对青钱柳的谱效关系研究甚少,因此本课题对青钱柳抗炎抑菌谱效关系开展了以下研究。第一部分青
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青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk)系胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属(Cyclocarya)植物,常生长在海拔500至2500米的多云多雾的森林之中,现仅存于中国南方。青钱柳具有降血糖、降血压、抗氧化和增强机体免疫功能等作用,被誉为“医学界的第三棵树”。目前对青钱柳的谱效关系研究甚少,因此本课题对青钱柳抗炎抑菌谱效关系开展了以下研究。第一部分青钱柳药材化学成分的指认基于同属植物青钱柳的化学成分研究,本课题采用高效液相色谱以及液质联用的方法,通过比对对照品与样品的保留时间、紫外吸收光谱、相对分子质量和离子碎片鉴定青钱柳药材中的化学成分,结果指认出原儿茶酸、绿原酸、香草酸、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚7种化合物,并建立高效液相色谱法同时测定青钱柳中7种化合物的分析方法,该方法简便易行、准确、可靠,可用于不同产地青钱柳药材中7种化学成分的鉴定。第二部分青钱柳药材指纹图谱的研究本实验建立10批不同产地青钱柳药材指纹图谱的测定条件,筛选出19个共有峰,并对其中的7个色谱峰进行指认,分别为原儿茶酸、绿原酸、香草酸、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚。相似度分析结果表明10批不同产地青钱柳药材的相似度有8批大于0.7,并利用SPSS软件进行聚类分析,其分析结果与相似度分析结果一致。根据聚类分析结果,可将10批不同产地青钱柳的药材分为2大类:A类和B类,其中A类可分为A1和A2两个亚类,A1是来自四川、武汉、宜昌、云南产地的青钱柳,A2是来自江西、张家界、大别山、广西产地的青钱柳;B类是来自贵州和河北产地的青钱柳。第三部分青钱柳药材抗炎抑菌谱效关系的研究利用体外抑菌和抗炎实验,以抑菌圈大小和NO、TNF-α和IL-6的释放量为药效评价指标,比对不同产地青钱柳药材的抗炎抑菌活性,结果表明不同产地的青钱柳样品均有不同程度的抗炎抑菌作用,并结合指纹图谱,进一步采用主成分分析法、灰色关联度分析法、偏最小二乘回归分析法,进行谱效关系的探究。主成分分析结果表明:在19个共有峰中提取前3个主成分,对方差的累积贡献率达到93.163%,大于85%,第5、6、7、8、9、11号峰对主成分贡献最大,第1、2、4、12号峰次之。灰色关联度分析结果表明:各个峰均有较大的灰色关联度,且第1、9、10、12、14号峰具有较大的抗炎抑菌灰色关联性。偏最小二乘回归分析结果表明:第5、10、15号峰对抗炎活性的标准化系数绝对值最大,为主要药效峰;第2、8、15、19号峰对抑菌活性的标准化系数绝对值最大,为主要药效峰。根据主成分分析法、灰色关联度分析法和偏最小二乘回归分析法综合分析,结果表明第5、8、12号峰对抗炎活性贡献最多,第1、4、6、9、11、15号峰对抑菌活性贡献最多,并指认出其中1号峰为原儿茶酸,4号峰为绿原酸,5号峰为香草酸,9号峰为异槲皮苷,11号峰为槲皮苷。证明青钱柳药材发挥抗炎抑菌作用的药效物质可能是以上几个化合物,为制定科学、规范、合理的质量标准提供了科学支撑。综上,本课题通过对青钱柳药材化学成分的指认及指纹图谱和抗炎抑菌谱效关系的研究,结果表明该药材发挥抗炎抑菌作用的药效物质可能是原儿茶酸、绿原酸、香草酸、异槲皮苷、槲皮苷等,为青钱柳的开发利用提供科学理论依据。
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