第一部分(临床部分)晚期喉鳞癌患者术后的生存和预后分析 背景与目的：目前晚期喉鳞癌患者的预后差，针对晚期喉癌预后的相关因素的研究结果差异较大。本研究旨在总结晚期喉癌的临床特征和治疗方法，探讨影响晚期(Ⅲ～Ⅳ期)喉鳞状细胞癌患者术后生存和预后的临床病理因素。 方法：回顾性分析1990年1月至2003年12月间中山大学附属肿瘤防治中心221例晚期喉鳞癌患者的临床病理资料。应用Kaplan—Meier法分析生存结果，通过Cox回归模型确立影响患者生存预后的独立因素，并建立晚期喉鳞癌的预后模型。 结果：本组221例晚期喉鳞癌患者术后的平均生存时间为96.58个月，2年和5年无瘤生存率分别为60.0％和43.0％；2年和5年累积生存率分别为76.9％和51.1％。Ⅲ期喉癌的无瘤和累积生存率均高于Ⅳ期；术后放疗可以提高切缘阳性患者的生存率；行部分喉切除术的患者的生存率与全喉切除术者相近。年龄、解剖分型、病理分期、手术切缘和放射治疗为影响患者无瘤生存的独立因素；而年龄、病理分期和手术切缘是影响患者累积生存率的独立因素。 结论：晚期喉鳞癌患者预后差，影响患者术后累积生存率的独立因素为年龄、病理分期和手术切缘。 第二部分(基础部分)Satb2基因在喉鳞癌中作用的研究第1章Satb2基因在喉鳞癌组织和正常组织中表达差异 目的：检测Satb2基因在喉鳞癌组织和癌旁正常喉粘膜组织中的表达是否存在差异。 材料和方法：RT—PCR检测satb2在正常喉粘膜组织、喉鳞癌组织和人喉癌细胞株Hep2中mRNA水平的表达；WesternBlotting检测satb2在正常喉粘膜组织、喉鳞癌组织和人喉癌细胞株Hep2中蛋白质水平的表达。 结果：RT—PCR结果显示，14例患者的中，satb2mRNA在正常组织中的表达量与其在癌组织中的表达量相近(P>0.05)。WesternBlotting显示，11例患者中，satb2蛋白在癌旁组织中的表达量明显高于其在癌组织中的表达量(11/14)；而3例患者的satb2蛋白在癌旁组织中的表达量与其癌组织中的表达量相等(3/14)。Satb2mRNA在人喉鳞癌Hep2细胞株中有mRNA水平的表达；Satb2蛋白在人喉鳞癌Hep2细胞株细胞株中的表达极低。 结论： 1.本步实验显示，satb2mRNA在癌旁组织中的表达与其癌组织中的表达量相近； 2.Satb2蛋白在癌旁(正常)组织中的表达量明显高于其在癌组织中的表达； 3.Satb2蛋白在喉鳞癌细胞株Hep2中的低表达。 第2章Satb2在喉鳞癌组织中的表达及其对患者预后的影响 目的：检测Satb2基因的在喉鳞癌组织中的蛋白表达水平及其对患者预后有影响。 材料和方法：本研究共收集了中山大学肿瘤防治中心1990年1月至2003年12月的86例以手术治疗为主的患者的喉鳞癌组织，和15例癌旁组织(组织病理学显示正常)。应用免疫组织化学方法检测satb2蛋白的表达情况。应用Kaplan—Meier法进行生存分析，通过Cox回归模型确立影响患者预后的独立因素。 结果：本组患者的2年和5年累积生存率分别为80.2％和71.7％。Satb2蛋白在癌旁组织中的表达呈强阳性；satb2蛋白在喉鳞癌组织的表达：48例阳性或38例阴性；Satb2表达阳性组和阴性组的5年生存率分别为80.5％和52.4％，有统计学差异(P<0.05)。单因素分析得出影响生存率的有统计学意义变量因素包括：年龄、侵犯双侧喉结构、侵犯甲状软骨、分期、切缘状态、肿瘤复发和satb2蛋白的表达情况等。多因素分析显示切缘状态、肿瘤复发和satb2蛋白的表达情况是影响患者预后的独立因素。 结论： 1.本步实验显示，satb2蛋白表达阳性的患者预后较好； 2.Satb2蛋白的表达情况、肿瘤复发和手术切缘状态是影响患者预后的独立因素，satb2蛋白在喉癌组织中的表达水平与患者的预后相关。 第3章Satb2基因在喉鳞癌细胞中作用机制的研究(Satb2基因对于喉鳞癌细胞增殖和转移能力的影响) 目的：检测satb2基因高表达对喉鳞癌细胞株Hep2的细胞生物学特性的影响。 材料和方法：构建转染载体plncx2-satb2，转染Hep2细胞，通过细胞生长曲线测定(计数法)，平板克隆实验和Transwell实验，观察satb2基因上调对喉鳞癌细胞株Hep2的增殖能力和侵袭转移能力的影响。 结果：本实验成功建立并筛选了高表达satb2的喉鳞癌细胞克隆。上调satb2基因的表达会明显抑制Hep2细胞株的增殖能力；平板克隆实验表明，上调satb2基因表达时，Hep2细胞的克隆形成能力明显减弱；Transwell实验显示，satb2基因表达上调时，喉癌Hep2细胞的侵袭能力低于未转染satb2基因的细胞。 结论： 1.体外实验表明，satb2基因表达上调会抑制Hep2细胞的增殖能力和克隆形成能力； 2.上调satb2基因表达可能会降低Hep2细胞的侵袭能力。