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目的:探讨补肾调肝方对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨组织中SOX9、Runx2表达的影响,明确软骨保护机制,为提高其防治KOA临床疗效及为更广泛推广应用,提供实验依据。方法:1建立KOA动物模型:采用改良Hulth造模法建立KOA大鼠模型。2实验分组:大鼠随机分为假手术组、KOA模型组(空白组)、KOA模型+补肾调肝方组(中药组)、KOA模型+氨基葡萄糖组(西药组),每组12只。分别在造模术后8周、12周、16周分别处死3只大鼠取软骨组织进行相关检测。3灌胃治疗3.1根据人与大鼠给药剂量换算公式,得出KOA大鼠的用药量;并按大鼠用药量制备出1.9g生药/ml的补肾调肝方水煎液,13.9mg/ml浓度的硫酸氨基葡萄糖胶囊(维固力)溶液。3.2在造模术后第13周起,中药组、西药组大鼠分别给予补肾调肝方水煎液、维固力溶液灌胃治疗。4苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)取KOA大鼠右后肢膝关节软骨组织行HE染色,并OARSI评分,评价补肾调肝方对软骨修复的治疗效果。5蛋白印迹(Western Blot,WB)法 取KOA大鼠右后肢膝关节软骨组织,用WB法检测Runx2、SOX9及β-catenin蛋白表达水平的变化,分析补肾调肝方对Runx2、SOX9及β-catenin表达的影响。结果:1中药组、西药组KOA大鼠分别经补肾调肝方、硫酸氨基葡萄糖灌胃治疗后,OARSI评分下降,但中药组下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。2 KOA大鼠关节软骨组织中SOX9蛋白表达量降低,Runx2升高;而正常软骨组织中表达量则无明显变化。3补肾调肝方能够上调KOA大鼠软骨组织中SOX9的表达,下调Runx2的表达用补肾调肝方对大鼠灌胃治疗4周后,SOX9蛋白表达量升高,Runx2蛋白表达量减低相较硫酸氨基葡萄糖灌胃组大鼠,对SOX9的影响更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。4 β-catenin与SOX9的表达负相关,而与Runx2的表达正相关。结论:观察并对比补肾调肝方与硫酸氨基葡萄糖灌胃治疗对KOA大鼠关节软骨OARSI评分、SOX9、Runx2、β-catenin表达的影响,得出了以下结论：(1)补肾调肝方对KOA大鼠关节软骨的保护优于硫酸氨基葡萄糖胶囊;(2)补肾调肝方是通过上调SOX9蛋白的表达水平促进软骨细胞增殖和自我修复、抑制软骨细胞和软骨基质退变吸收而发挥治疗作用;(3)SOX9、Runx2表达的动态时空平衡是维持关节软骨正常形态的关键因素。