染料木黄酮对翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用研究

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[目的]:染料木黄酮(Genistein)是一种特异性的生长因子受体酪氨酸激酶的抑制剂,已证实对多种细胞的增殖抑制作用.观察它对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞(Human Pterygium Fibroblasts,HPF)的抗增殖作用,为临床上辅助治疗翼状胬肉和预防及治疗翼状胬肉的复发提供一条新思路.[材料和方法]:将从临床上取的翼状胬肉标本剪碎后进行体外贴壁细胞常规培养,取第三或四代细胞做实验.(1)SABC法染色鉴定翼状胬肉成纤维细胞.(2)将上述细胞分为6组,实验组加入五组不同浓度的染料木黄酮(3.125、6.25、12.5、25、50 μg·ml<-1>),阴性对照组加入DMEM培养液,作用48小时后,用免疫组化技术对实验组和对照组细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况进行检测,并对检测结果进行图像分析.(3)将实验分为7组,每组分别加入上述五组不同浓度的染料木黄酮、二甲基亚砜(DMSO)、DMEM培养液作用24、48、72、96、120小时后,噻唑蓝比色法(MTT法)检测染料木黄酮对翼状胬肉成纤维细胞增生抑制的影响,测定活细胞的吸光度值.[结论]:染料木黄酮在浓度≥6.25 μg·ml<-1>时可显著抑制体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞的增殖,且呈剂量与时间依赖性.提示我们染料木黄酮有可能在今后预防和治疗翼状胬肉术后复发有所帮助.
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