氩氦刀冷冻消融兔VX2肝肿瘤对细胞免疫功能的影响

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目的通过对兔VX2肝癌模型进行冷冻消融治疗,验证及探讨冷冻消融治疗肿瘤对机体细胞免疫功能的影响,为冷冻免疫的临床应用奠定基础。材料和方法选取新西兰大白兔60只,随机分为2组,每组30只,两组均制成VX2肝肿瘤模型,对两组兔肝内注射肿瘤悬液后,每隔一周观察小鼠肝脏肿瘤生长情况。肿瘤直径达2~3cm时实验组(A组)行氩氦刀冷冻治疗,对照组(B组)只植入冷冻探针,而不予冷冻治疗。 A组分别于冷冻前和冷冻后取活检,比较冷冻前后的病理变化。A、B两组于冷冻前1d和术后1d、3d、7d分别采耳缘静脉血,采用流式细胞仪检测兔外周血T细胞亚群,比较两组术前与术后CD4+、CD8+、CD4+CD25+T淋巴细胞、CD4+/CD8+比值以及IL-2水平变化情况,以评价冷冻治疗对机体细胞免疫的影响。结果兔VX2肝肿瘤模型制作成功率为100%,接种后1~2周,CT扫描证实兔肝内肿瘤生长,接种后3~4周肿瘤直径在2~3cm,可达到实验要求。治疗前15只出现双肺、腹腔等多发转移,2只出现腹壁种植转移,其中7只死亡。冷冻治疗后A组有3只5天内死亡。A组冷冻后组织病理显示,组织大部分退变坏死,细胞轮廓消失。治疗后与治疗前比较,随着时间的推移,A组CD4+T细胞的百分率以及CD4+/CD8+的比值呈上升趋势而CD8+T细胞和CD4+CD25+T细胞百分率则呈降低趋势;B组CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低,CD4+CD25+T细胞百分率呈略有升高;治疗后,IL-2水平A组明显高于B组。两组生存期有明显差异。结论兔VX2肝肿瘤模型采用经皮穿刺肿瘤悬液注射法种植肿瘤,方法简单,成功率高。氩氦刀在杀灭局部肿瘤的同时可刺激机体免疫功能提高,可使CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值升高,并且延长了生存期;部分有负向免疫调节作用。
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