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本项研究采用酸性α-醋酸萘酯酶染色法、免疫酶组织化学法、透射电镜法和荧光定量PCR检测技术。对服用益生素及其与ND疫苗联合使用后,雏鸡呼吸道和消化道局部黏膜免疫组织—哈德尔氏腺、盲肠扁桃体、十二指肠和回肠派伊尔结的T细胞及其亚群CD4+T、CD8+T细胞数量和IL-2 mRNA表达的动态变化进行了较全面系统的研究,揭示益生素及其与ND疫苗联合使用后,雏鸡局部黏膜细胞免疫变化规律及其机制。结果发现：1.服用益生素雏鸡,其哈德尔氏腺、盲肠扁桃体、十二指肠及回肠派伊尔结T细胞数量在4-14天较对照雏鸡明显增多(P<0.05或P<0.01);ND疫苗免疫后7-42天,益生素组、ND疫苗组、益生素ND免疫雏鸡上述免疫组织T细胞数量明显高于空白对照雏鸡(P<0.05或P<0.01)；其中,ND疫苗组、益生素ND免疫雏鸡上述组织被检指标明显高于益生素雏鸡(P<0.05或P<0.01)；益生素ND免疫雏鸡局部免疫组织T细胞数量又不同程度高于ND疫苗单独免疫雏鸡,表明益生素可促进局部免疫组织发育,增强雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜的细胞免疫和对ND疫苗的免疫应答效应。2.益生素组、ND疫苗组、益生素ND免疫雏鸡哈德尔氏腺、盲肠扁桃体、十二指肠及回肠派伊尔结CD4+T细胞数量均不同程度高于空白对照雏鸡(P<0.05或P<0.01)；益生素ND免疫雏鸡上述被检指标均不同程度高于ND疫苗单独免疫雏鸡,但统计学差异不显著(P>0.05)。表明疫苗接种提高了机体局部黏膜的细胞免疫水平。ND疫苗免疫雏鸡上述免疫组织的CD8+T细胞数量明显低于未接种疫苗的益生素雏鸡和空白对照雏鸡(P<0.05或P<0.01),这种变化是有利于细胞的激活,细胞因子的释放和抗体的产生。3.益生素组、ND疫苗组、益生素ND免疫雏鸡哈德尔氏腺、盲肠扁桃体、十二指肠及回肠派伊尔结IL-2 mRNA表达均不同程度高于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01)；益生素ND免疫雏鸡上述免疫组织被检指标不同程度高于ND疫苗单独免疫雏鸡,表明益生素添加和ND疫苗接种刺激T细胞增殖、分化,从而促进IL-2 mRNA表达。4.ND强毒攻击后,对照雏鸡全部发病死亡,发病率和死亡率达100%;益生素雏鸡和ND疫苗单独免疫雏鸡发病率分别为60%、20%,但均耐过；益生素ND免疫雏鸡未见异常变化；表明益生素可提高机体的抵抗力,增强ND疫苗的免疫效果,使机体能更有效抵抗强毒的攻击。5.组织超微结构检查发现,应用益生素雏鸡,其盲肠扁桃体、十二指肠和回肠微绒毛长度增加,吸收细胞的线粒体、高尔基体、核糖体、内质网增多；杯状细胞增加；哈德尔氏腺腺泡内有大量分泌颗粒。