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随着我国水产养殖业的快速发展,大量药物滥用和废水排放造成了环境的严重污染。加上近年来国家对环保要求的提高,天然中草药因具有毒副作用少、低残留、不产生耐药等特点开始被广泛关注。部分药用植物作为天然化合物在水产养殖中具有替代抗生素和免疫预防药物的潜力。本研究以虎龙杂交斑（Epinephelus fuscoguttatus♀×Elancedatiis♂）为试验对象,研究了两种中草药,马鞭草（Verbena officinalis）和鹿衔草（Pyrola calliantha）以及复方草药对虎龙杂交斑生长性能、抗氧化能力、生化指标、抗氧化免疫能力和肠道微生物的影响。试验设计为一个对照组C和9个试验组包括A2、A4、A6（分别添加2%、4%、6%的马鞭草）B2、B4、B6（分别添加2%、4%、6%的鹿衔草）AB2、AB4、AB6（添加2%、4%、6%的两种草药按1:1配伍的复方）。然后将中草药粉末按不同水平和配伍添加到基础饲料中,饲喂虎龙杂交斑8周。试验结果如下:1.通过高效液相色谱法（HPLC）测定:马鞭草水提液中含有0.13mg/ml的马鞭草苷,和戟叶马鞭草苷成分;鹿衔草水提液中含有0.13mg/ml的熊果苷。2.饲料中添加马鞭草可以提高虎龙杂交斑的生长性能,其中4%的添加水平效果最佳,相对增重率较对照组提高147.36%。虎龙杂交斑的相对增重率在马鞭草组（2%、4%、6%）中比对照组分别显著提高19.42%、47.36%、23.83%（p＜0.05）。马鞭草组饵料系数比对照组分别显著降低15.42%、33.71%、20.57%（p＜0.05）。3.饲料中添加鹿衔草对虎龙杂交斑的生长无促进作用,虎龙杂交斑相对增重率在鹿衔草组（2%、4%、6%）分别显著低于对照组9.5%、7.89%、11.18%（p＜0.05）。鹿衔草组饵料系数比对照组分别显著升高14.85%、19.42%、24%（p＜0.05）。4.饲料中添加马鞭草和鹿衔草的复方对虎龙杂交斑的生长有一定的促进作用,但不如马鞭草组效果显著。AB4、AB6组的相对增重率分别显著高于对照组15.7%、13.8%（p＜0.05）,饲料系数比对照组分别降低8%、5.71%（p＞0.05）。饲料中添加马鞭草和鹿衔草复方和对鱼体形体指标、全鱼常规营养成分和血清生理生化指标无显著影响（p＞0.05）。5.饲料中添加马鞭草和鹿衔草以及复方草药均能提高虎龙杂交斑中血清和肝胰脏的抗氧化能力,鹿衔草效果最为明显,其次是复方草药。B6组血清的T-AOC比对照组显著提高75.67%（p＜0.05）。B2、B4、AB2组血清CAT活力比对照组提高49.88%、46.30%、46.77%（p＜0.05）。A2、A4、B2、B4、AB2组肝胰脏SOD活力比对照组分别显著提高51.81%、55.53%、59.99%、56.13%、74.66%（p＜0.05）。A2、A4、A6、B2、B6、AB2组的肝胰脏T-AOC活力比对照组分别显著提高122.72%、140.90%、113.63%、104.54%、131.81%、118.18%（p＜0.05）,并在A4组达到最高水平。6.饲料中添加马鞭草和鹿衔草能增强虎龙杂交斑肝胰脏和肠道的蛋白酶和脂肪酶活力,对淀粉酶无显著影响。A2、A4、B2、B4组胰蛋白酶相对对照组提高55.65%、55.62%、59.6%、55.62%（p＜0.05）。A4、A6、B2、B4组脂肪酶较对照组显著提高38.46%、53.84%、35.89%、38.46%（p＜0.05）。7.饲料中添加马鞭草能一定程度影响虎龙杂交斑的肠道发育,增加肠道的肌层厚度和绒毛高度,其中4%的添加水平效果最为显著（p＜0.05）。鹿衔草试验组能一定程度降低虎龙杂交斑肠道的肌层厚度和绒毛高度但与对照组相比均无显著变化（p＞0.05）,AB组无显著影响（p＞0.05）。两种草药均能一定程度提高虎龙杂交斑肠道微生物的菌群多样性和物种丰度,改变菌群结构和优势种群。8.饲料中添加马鞭草和鹿衔草能提高虎龙杂交斑提高免疫相关基因Ig M、TRIF、HSP90、IL-1β,TNF-α和IFN的表达,并随着水平增加,其效果先增加后降低,A4、A6组能显著提高脑、脾、肾、鳃中HSP90的表达（p＜0.05）,显著提高鳃、肾中Ig M、TRIF基因的表达（p＜0.05）。鹿衔草组都能显著提高几种免疫相关基因在鱼体各组织中的表达（p＜0.05）。脾脏中最高（B6组）（p＜0.05?）,其次是鳃（B4组）和肾脏,随着添加水平增加表达量增高;TNF-α的最高表达发生在鳃（B4组）（p＜0.05）,其次是肾脏（B6组）、脾（B6组）和脑（B4组）在鳃和肾中表达显著提高。复方组能显著提高HSP90、Ig M、TRIF在鳃、脾、肾中的表达（p＜0.05）。9.饲料中添加马鞭草和鹿衔草能增强虎龙杂交斑的免疫保护力,用溶藻弧菌攻毒试验后,各实验组的死亡率均低于对照组。其中马鞭草组死亡率最低为25%,鹿衔草组的死亡率最低为12.5%,复方组的死亡率最低为25%,鹿衔草组保护力最强其次为复方组。综上,本试验结果表明饲料中添加马鞭草能显著提高虎龙杂交斑的生长性能,其中添加4%水平相对增重率可提高147.36%,能有效提高虎龙杂交斑抗氧化能力和消化酶活力,改善肠道结构,提高虎龙杂交斑肠道微生物的菌群丰度,提高免疫相关基因Ig M、TRIF、HSP90、IL-1β,TNF-α和IFN的表达,并随着水平增加,其效果先增加后降低;饲料中添加鹿衔草对虎龙杂交斑的生长有一定的抑制作用,其中6%添加水平最高达到11.18%,但能显著提高虎龙杂交斑的抗氧化能力和免疫相关基因Ig M、TRIF、HSP90、IL-1β,TNF-α和IFN的表达,提高免疫保护力,随着水平增加,其效果逐渐增强;饲料中添加复方草药对虎龙杂交斑的生长有一定促进作用,最大提高15.7%,其效果低于马鞭草,能有效提高虎龙杂交斑的抗氧化能力和免疫相关基因的表达,提高免疫保护力,其效果低于鹿衔草。综合生长和免疫试验结果建议在石斑鱼饲料中添加4%的马鞭草为最适添加水平。