文心兰（Oncidium.spp）是兰科（Orchidaceae）文心兰属（Oncidium）的热带气生兰,具备优美花形、绚丽花色等特点,深受人们喜爱,但其切花有香味的品种极少,限制了其经济价值。如果利用转基因技术转入香味基因,可能使得文心兰获得具有香味的转基因新品种。本研究以文心兰‘柠檬绿’为材料,运用组织培养的方法进行高效再生体系的建立及受体系统的优化,再利用根癌农杆菌介导GUS基因转化文心兰原球茎,建立和优化其转基因系统,并将Lslis目的基因载体导入农杆菌,实现目的基因对文心兰的转化,为文心兰香味品种的培育提供基础。主要研究结果如下:（1）文心兰再生体系的建立及优化:利用文心兰‘柠檬绿’无菌苗进行诱导、增殖、分化、生根和移栽等一系列的培养研究,再以诱导出的原球茎为材料,比较原球茎直径大小、不同激素配比、甘露醇等因素对原球茎受体生长的影响,筛选出最佳的受体生长条件。研究表明,NAA促进原球茎的诱导最显著,1/2 MS培养基中添加0.5 mg/L NAA、0.5 mg/L 6-BA和0.3 mg/L TDZ的诱导率最高,达到48.0%。活性炭含量和碳水化合物的不同组合对原球茎的增殖作用存在极显著差异,添加不同天然复合物的处理生根效果都显著优于对照,椰子水的效果最好,每株生根近4条。炼苗移栽的成活率达到100%。即:原球茎最佳诱导培养基是1/2MS+0.5 mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+0.3 mg/LTDZ;最佳增殖培养基是1/2MS+4.0 mg/L6-BA+0.4 mg/LNAA+1.0g/L活性炭+20 g/L海藻糖;最佳生根培养基是1/2MS+0.8 mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+10%椰子水+30 g/L蔗糖;以1.5 mm原球茎的切块大小搭配0.2或0.6mg/L6-BA和0.4 mg/LNAA的培养基为受体最优生长条件;较短时间甘露醇高渗预处理对原球茎恢复生命力的影响最小,预处理1 h,0.1⁰.25 mol/L的浓度为最佳预处理。（2）遗传转化体系的建立优化及芳樟醇合酶基因的转化:设计抗生素浓度梯度对受体生长的抗敏感性试验,以期获得最佳筛选条件,头孢霉素达到60 mg/L时农杆菌抑菌效果最佳;而卡那霉素对文心兰原球茎作用明显,较低浓度就使其难以恢复生长,达到50 mg/L时,无原球茎存活,可作为有效的筛选剂量;探究不同因素对遗传转化效率的影响得出,侵染前对原球茎甘露醇高渗处理的最佳浓度为0.15 mol/L,处理时间1 h,农杆菌菌液OD₆₀₀值0.4,侵染时间30或50 min,暗培养2 d,除菌20 min,侵染时加入100 umol/L AS,GUS瞬时表达率最高,可达64.7%。成功构建LsLis-pBI121植物表达载体,利用优化的转基因系统共转化1800粒原球茎,经过抑菌筛选存活543粒,存活率为30.2%,继续抗性筛选,存活9粒,存活率约0.5%左右,筛选获得抗性的转基因文心兰原球茎。