论文部分内容阅读
目的:通过观察通窍活血汤对急性脑出血大鼠神经功能、NSE、BDNF、SOD、MDA、脑水肿的影响,初步探讨通窍活血汤对大鼠脑出血防治的可能机制。方法:1.分组:取体重在(250±20)g的雄性SD大鼠84只,随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(简称“西药组”)、通窍活血汤高剂量组(简称“高剂量组”)、通窍活血汤中剂量组(简称“中剂量组”)、通窍活血汤低剂量组(简称“低剂量组”)每组各14只;2.造模方法:选用鼠尾自体采血注射法造模,假手术组除不注血外其余操作步骤同其他各组;3.给药方法:西药组给予依达拉奉1.5mg/kg/d腹腔注射,高、中、低剂量组分别给予通窍活血汤1.2g/Kg/d、0.6g/Kg/d、0.3g/Kg/d灌胃,假手术组、模型组给予相同剂量生理盐水灌胃,各组连续给药14天后造模;各组大鼠完成造模后,每天一次神经功能缺损评分,选用Zea Longa5分制法进行,选取神经功能缺失评分在1-3分者作为给药对象;大鼠清醒后,假手术组、模型组继续给予生理盐水灌胃,低、中、高剂量组和西药组同造模前给药方法继续给药1周;4.取材:末次灌胃及注射给药后各组大鼠均采用腹腔麻醉法,分离腹主动脉并穿刺采血;采血后立即心脏灌注并断头取脑组织。5.指标检测:Zea Longa5分制法进行神经功能缺失评分,SOD活性的检测按照说明采用黄嘌呤氧化酶法,MDA含量的检测采用硫代巴比妥酸法;ELISA法检测NSE含量;免疫组化法检测BDNF含量,光镜观察脑出血后血肿周围神经细胞形态变化。采用干湿重法检测脑组织含水量。结果:(1)神经功能缺失评分比较:与假手术组比较,其余各组神经功能缺失评分均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组神经功能缺失评分有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组、西药组神经功能缺失评分明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组、西药组神经功能缺失评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组、西药组神经功能缺失评分降低,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组与西药组比较,神经功能缺失评分变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)SOD活性比较:与假手术组比较,模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、西药组SOD活性下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组及西药组SOD活性有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组及西药组的SOD活性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量和西药组SOD活性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,高剂量组SOD活性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)MDA含量比较:与假手术组比较,其余各组MDA含量均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组MDA含量有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组及西药组MDA含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组及西药组MDA含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组和西药组MDA含量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,高剂量组MDA含量有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)BDNF含量比较:与假手术组比较,其他各组的BDNF含量均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组BDNF表达有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05);中、高剂量组及西药组BDNF表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中剂量组BDNF表达有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组及西药组BDNF表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组及西药组BDNF表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组与西药组比较,BDNF变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)NSE含量比较:与假手术组比较,模型组、低、中剂量组NSE含量均显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组及西药组NSE含量增加不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,低剂量组NSE含量变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组及西药组NSE含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组及西药组NSE含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组、西药组NSE含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组与西药组比较,NSE含量变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。(6)脑含水量比较:与假手术组比较,模型组及其余各给药组脑组织含水量均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组及西药组脑组织含水量均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组及西药组脑组织含水量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组及西药组脑组织含水量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组与西药组比较,脑组织含水量变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。(7)光镜结果:光镜下观察,假手术组神经细胞结构完整,胞核、胞浆染色均匀,未见异常改变。模型组可见神经元及细胞间隙发生水肿,组织结构疏松,神经细胞坏死,血肿周围有少量的炎症细胞浸润。低、中、高剂量组可见不同程度的脑组织水肿及炎症细胞浸润,但随着给药剂量的增高,水肿程度及炎症反应逐渐降低。西药组血肿周围神经细胞结构排列相对完整,未见明显的脑水肿及炎症细胞浸润。结论:1.通窍活血汤可改善脑出血大鼠神经功能缺失评分,减轻脑水肿,改善脑出血后血肿周围神经细胞变性坏死及炎症细胞浸润。2.可能的机制:降低MDA含量,提高SOD活性达到清除氧自由基;促进BDNF的表达,降低NSE含量,从而保护神经细胞。3.通窍活血汤在防治大鼠脑出血作用方面具有一定量效关系。