纳米银凝胶体内分布蓄积排泄及其肝肾毒副作用

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目的:  纳米银凝胶单次家兔阴道给药后,测量不同时间点雌性家兔体内血液,各脏器,排泄物银含量,观测银元素表征的纳米银血浆浓度-时间动态变化,观测银元素在家兔体内各脏器的吸收、代谢、分布和排泄情况。  纳米银凝胶多次家兔阴道给药后,测量停止给药后不同时间点家兔血液,各脏器,排泄物银含量,观测纳米银在体内蓄积情况。  纳米银凝胶多次家兔阴道给药后,测量停止给药后不同时间点家兔血液的生化功能,判定纳米银多次给药是否对家兔造成肝肾功能影响。  方法:  纳米银凝胶单次给药组,以纳米银凝胶为研究对象,通过模拟临床给药方式——阴道给药,研究纳米银凝胶在此剂量(按家兔体重0.093g/kg.天,凝胶纳米银浓度为100ppm),家兔单次阴道给药,建立家兔阴道凝胶给药模型,采取严格给药方法,确保纳米银凝胶经阴道进入家兔体内,避免经口胃肠进入体内的可能。于阴道给药后的第1、2、5、9、12、24、48小时7个时间点,每时间点8只实验家兔,处死家兔取血液和脏器(心,肝,脾,肺,肾,胃内物,阴道,子宫)和排泄物(粪便,尿液),并利用电感耦合等离子体质谱分析仪(ICP-MS)检测各组织脏器银含量,检测纳米银在家兔体内的吸收、代谢、分布和排泄情况分布情况。  多次纳米银凝胶给药组,纳米银凝胶在此剂量(按家兔体重0.093g/kg.天,凝胶纳米银浓度为100ppm)连续经家兔阴道给药14天,建立家兔阴道凝胶给药模型,采取严格给药方法,确保纳米银凝胶经阴道进入家兔体内,避免经口胃肠进入体内的可能。设停止给药后的第1天、2天、7天、1月4个时间点组,另设空白对照组。与相应时间点时间处死家兔取血液、脏器(心、肝、脾、肺、肾、胃内物、阴道、子宫),排泄物(粪便、尿液),利用电感耦合等离子体质谱分析仪(ICP-MS)检测银含量,各时间点各组织银含量与对照组银含量比较,用单因素方差分析评价是否存在差异,是否会产生蓄积作用。  纳米银凝胶多次给药组处死家兔前,取家兔耳缘静脉血,用全自动血液生化分析仪,测定实验组与对照组家兔尿素氮(UREA)、肌酐(CRE)及天冬氨酸转氨酶(AST)谷丙氨酸氨基转移酶(ALT),胆固醇(CHO),碱性磷酸酶(ALP),血钙,血磷含量,用单因素方差分析比较评价是否存在差异,分析评价其对家兔肝肾功能毒副作用。  结果:  单次给药后银主要分布在阴道,粪便尿液银含量高于其他脏器银含量,随时间阴道银含量在给药后2小时达峰值,12小时后下降到检测线范围下限。  连续14天阴道给药后,纳米银主要分布在阴道,卵巢,肝脏。停药1天、2天、7天后阴道纳米银含量,停药2天、7天后卵巢纳米银含量,停止给药后1天、7天肝脏银含量与空白组对照有统计学差异(P<0.05)。停止给药30天后阴道,卵巢,肝脏纳米银含量与空白组对照无差异(P>0.05)。粪便及胆汁检测到银含量血液及其它各脏器纳米银含量与空白对照无统计学差异或在仪器检测线范围下限。  连续14天阴道给药后,实验组与停药1天、2天、7天、30天后对照组尿素氮、肌酐及谷丙氨酸氨基转移酶、谷草氨酸氨基转移酶含量、胆固醇、碱性磷酸酶,血钙,血磷对照无统计学差异(P>0.05)。  结论:  单次给药组,纳米银凝胶在此剂量(按家兔体重0.093g/kg.天,凝胶纳米银浓度为100ppm),单次经阴道给药,纳米银经给药部位阴道吸收入血,除阴道外未检测到银在家兔体内的动态分布情况。  多次给药组,纳米银凝胶在此剂量(按家兔体重0.093g/kg.天,凝胶纳米银浓度为100ppm),下连续14天经阴道给药纳米银主要分布在阴道、卵巢、肝脏、与国内外文献报道的分布到肾脏,甚至通过血脑屏障到脑组织存在差异。停止给药后,分布到各脏器的银,经胆汁排入肠道随粪便排出体外,无蓄积。  纳米银凝胶在此剂量(按家兔体重0.093g/kg.天,凝胶纳米银浓度为100ppm)下连续14天经阴道给药,对家兔肝肾功能无毒副作用。
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