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第一部分成人急性淋巴细胞白血病CRLF2突变特点、表达水平及其临床意义目的:细胞因子受体样因子2(cytokine receptor-like factor 2,CRLF2)可促进早期B淋巴细胞的增殖,对正常B淋巴细胞的发育起着重要的作用。本研究将探讨成人急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中CRLF2突变特点、表达水平及其与预后关系。方法:本研究通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)方法,特异性扩增129例成人ALL患者CRLF2外显子(exon)1-6,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定、DNA纯化、sanger测序,并将测序结果与基因库比对,分析突变类型、突变发生率及其临床特点。通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法,检测CRLF2表达水平。分析CRLF2在B-ALL、T-ALL以及正常对照之间可能存在的表达差异。分析CRLF2表达水平与IKZF1缺失可能存在的关系及其临床意义。统计学分析采用SPSS 20.0软件,计量资料采用非参数Mann-Whitney检验,计数资料采用χ2检验(或Fisher精确检验),采用Kaplan-Meier检验对ALL患者进行生存分析及预后关系研究。P<0.05为差异有统计学意义。结果:本组CRLF2共检测到6种基因改变类型,其中P224L、R186S提示预后良好,L86I、F232F、W255C可能与预后不良有关。在无IKZF1缺失的患者中,A11A突变组的RFS明显长于野生型组。CRLF2在ALL患者表达水平明显高于正常人。CRLF2高表患者预后较差,总生存期明显低于CRLF2低表组。CRLF2表达水平与IKZF1缺失有关,IKZF1缺失患者的CRLF2表达水平明显高于无IKZF1缺失患者。提示CRLF2与IKZF1之间可能存在功能上的联系。结论:CRLF2突变及表达水平异常在成人ALL的发生发展中起着重要作用,本组检测到的新型突变R186S、P224L与预后良好有关,CRLF2表达水平增高往往提示不良预后。第二部分 SH2B3在中国成人急性淋巴细胞白血病中的突变研究目的:SH2B3(Srchomology2B3)编码SH2配体适应蛋白LNK,可以抑制JAK-STAT信号通路和细胞因子信号通路的激活,SH2B3的失活突变,可以导致JAK-STAT信号通路激活,从而引起急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的发生。本组将研究成人ALL患者SH2B3突变特征及其临床意义。方法:使用PCR及巢式PCR的方法,特异性扩增SH2B3外显子,其后进行DNA纯化、测序,测序结果与NCBI-BLAST进行比对,分析突变类型、突变发生率及其临床特点。统计学分析采用SPSS 20.0软件,计量资料采用非参数Mann-Whitney检验,计数资料采用χ2检验(或Fisher精确检验),采用二元Logistic回归、Kaplan-Meier检验、COX回归对ALL患者进行生存分析及预后关系研究。P<0.05认为有统计学意义。结果:本组107例初发ALL患者共检测到两种基因改变类型,c.724C>T,p.P242S及c.784T>C,p.W262R。经过比对,两种基因改变均为单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)类型,分别为 rs3184504 和 rs78894077。其中SH2B3P242S基因改变组的EFS、OS与野生型组相比,无统计学意义的延长。在无IKZF1缺失的患者中,P242S基因改变组的EFS、OS长于野生型组,差异有统计学意义,提示P242S是一种预后良好的基因改变类型。而W262R基因改变患者多次复发,包括髓内复发及中枢复发,预后较差,因此认为W262R与复发以及预后不良相关。结论:SH2B3突变在成人ALL的发生发展中起着重要作用,本组检测到的两种SNP类型可能与患者的预后相关,有望成为新的分子预后靶点。