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目的:黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)和杂色曲霉素(Sterigmatocystin,ST)是众所周知的毒性极强的真菌毒素。在食品安全方面,其为进出口贸易之必检项目,而且也建立了国际性之最高残留限量要求标准(MRL值),如果可以建立一个预警检测方案将能够在毒素未产生前即获得危险性报告,而有机会及时采取措施避免进一步的经济损失。而要建立预警(predict)检测的手段需要选定一个毒素的生物指示分子(biomarker)。方法:1)建立(Versicolorin A,VA)的HPLC检测方法,包括VA标准品的分离、纯化制备和鉴定。2)对VA的毒性进行评价,把纯化之VA标准品进行毒理学实验。以Ames试验和人体外周淋巴细胞微核实验进行。3)对纯培养的黄曲霉和寄生曲霉以及感染了寄生曲霉的大米样品检测其VA和ST及AFTB1的产出情况。本项目的关键问题和工作难点在于VA标准品的纯化制备,以及获得足够的VA以用于毒性的分析和评价。计划利用可积累VA的寄生曲霉诱变菌株。并使用了分析型高效液相色谱仪、制备型高效液相色谱仪和高效液相质谱仪的现代检测技术。结果:1)本文成功地纯化出纯度达98%以上的VA标准品20mg。2)毒理学实验显示Ames试验呈阳性结果:VA 2.5μg/皿S9+,5μg/皿S9-(TA98)。而在人体外周淋巴细胞微核实验在4800nmol/L时呈阳性结果,表明VA为一遗传毒物。3)纯培养的黄曲霉和寄生曲霉在各培养基上,VA均能够在第7天和第10天稳定地检测到,AFTB1仅在PG培养基上,第10天才被检测到。在染毒大米(寄生曲霉)样品中,27℃下,第5、7、10天均可检测到VA而AFTB1要到第14天才能够被检测到(TLC法)。在28℃下,第3、5、7、10天均可检测到VA,而AFTB1在第7天才开始检测到(HPLC法)。结论:建立了用HPLC方法检测VA的手段。VA作为黄曲霉毒素的预警报告分子是可行的。VA显示致畸变毒性。Ames试验显示在鼠肝微粒体存在或不存在下均呈阳性(S9+2.5μg/皿,S9-5μg/皿);人体外周淋巴细胞微核实验显示VA遗传毒性呈阳性(1.6μg/ml)。因此,粮食样品中检出VA意味着该样品存在着高危险性的AFTB1污染,而且该样品已被毒素污染虽然此时可能未检出AFTB1。