【摘 要】
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我们首次从蛋白水平深入研究了HetN在丝状蓝细菌异形胞分化及模式形成中的生理功能.首无,从Anabaenasp.PCC7120和NostocpunctiformeATCC29133中分别克隆出hetN基因,并在体外
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我们首次从蛋白水平深入研究了HetN在丝状蓝细菌异形胞分化及模式形成中的生理功能.首无,从Anabaenasp.PCC7120和NostocpunctiformeATCC29133中分别克隆出hetN基因,并在体外高效表达出重组蛋白,纯化后制备了高效多克隆抗体.蛋白特性分析显示,HetN蛋白是一跨膜蛋白.利用水溶性双相膜分离技术,并结合Western印迹分析,我们发现在有氮培养条件下,hetN基因产物存在于类囊体膜上,减氮后,hetN表达量逐渐下降,减氮6小时之后就观察不到内源HetN蛋白的存在,这表明蓝细菌内源hetN基因有达受到严格调控,而且hetN基因产物参与异形胞分化的早期调控过程.其外,我们还克隆了与hetN调控蓝细菌异形胞分化及模式形成相关的系列基因,如Anabaenasp.PCC7120hetI基因及其Synechcccussp.PCC7002同源基因;AnabaenantcA基因及其同源基因ntcA-lie1和ntcA-lie2.我们在大肠杆菌中分别高效表达出HetI重组蛋白、NicA重组蛋白、GST-NicA-lie1融合蛋白和GST-NicA-like2融合蛋白,并初步分析了这些蛋白的生理特性和功能.
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