目的:1.验证SIRT3在妊娠中是否表达,及其表达的变化;2.明确SIRT3敲除对妊娠心脏的影响;3.探索SIRT3在妊娠诱导的心肌肥厚中的作用机制。方法:1.小鼠妊娠晚期模型的建立选用年龄和体重接近的C57BL/6雌鼠与同年龄的C57BL/6雄鼠进行配种,观察到阴栓的这天为第0天,18天后对小鼠心脏取材。再引入SIRT3敲除和野生型雌鼠,分别分为对照组和妊娠组,与同基因型的雄鼠配种,同样妊娠18天后取材。2.超声心动图测量妊娠晚期小鼠心脏的结构和功能第18天,采用吸入麻醉的方法将小鼠固定在超声台上,剃毛,心脏区域涂上耦合剂,用超声探头测量左右心室收缩、舒张末期内径以及左心室前壁收缩、舒张厚度等心脏超声指标。3.小鼠心脏取材小鼠妊娠的第18天行安乐死处理,测量其体重,心脏重量、肺脏重量和胫骨长度等指标。完成测量后,迅速将小鼠心脏置于1.5ml的高温灭菌EP管中,放入液氮中快速冷冻,并放置在-80℃冰箱冻存备用。4.组织学检测小鼠取材的心脏放入4%的多聚甲醛固定,后经脱水、石蜡包埋、切片和脱蜡等步骤,分别做苏木精-伊红染色,马松三色染色以及小麦麦胚凝集素染色,并用Image-Pro Plus软件对心肌细胞大小和心肌纤维化进行定量分析。5.分子生物学检测使用Western Blot的方法检测SIRT3、GLUT4、CollagenⅠ、AMPK-α等蛋白的表达水平,并通过Image-J分析软件对蛋白表达进行定量分析。qRT-PCR检测SIRT3、GLUT4、BNP、MYH-7等基因的表达水平。6.统计方法实验数据以均数±标准误（X±SEM）表示,使用SPSS 21.0统计分析软件进行统计学分析,差异性检验水准均设为P=0.05（双侧）。两组间比较符合正态分布的用独立样本t检验,不符合正态分布的,用非参数检验。多组间比较采用双因素方差分析和Bonferroni事后检验。本研究所有统计学分析中,P＜0.05代表具有统计学意义。结果:1.SIRT3在妊娠晚期的生理性心肌肥厚中表达增加在C57BL/6小鼠的妊娠晚期,心脏重量明显增加,心重/胫骨长也比对照组有所增加。组织切片染色结果表明心肌细胞明显增大,Western Blot和qRT-PCR结果表明SIRT3表达增加。2.SIRT3敲除导致妊娠晚期心脏扩大比较SIRT3敲除和野生型小鼠妊娠晚期的心重以及心重/胫骨长后发现,SIRT3敲除的妊娠晚期小鼠心脏重量明显增加。超声心动图检测结果显示妊娠晚期小鼠心脏扩大,组织切片HE和WGA染色结果证明心肌细胞肥大。3.SIRT3敲除没有引起病理心肌肥厚的改变马松染色结果表明心脏没有明显增加的纤维化。Western Blot和qRT-PCR显示BNP、CollagenⅠ、MYH-7等病理心肌肥厚标记物没有明显改变。4.SIRT3引起的妊娠晚期生理性心肌肥厚和能量代谢有关与SIRT3野生型相比,Western Blot结果显示SRT3敲除小鼠的AMPK-α、GLUT4表达降低,qRT-PCR结果表明和脂肪酸代谢有关的PDK4的表达增加。结论:在妊娠期间,SIRT3作用于心脏导致与妊娠相关的生理性心肌肥厚的变化,其作用机制可能与能量代谢相关。因此,SIRT3介导了妊娠诱导的心脏适应。