α-半乳糖苷酶固态发酵中试技术参数研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chuanqi111
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过物理和化学复合诱变处理扬奇青霉(Penicillium janczewskii),筛选高产α-半乳糖苷酶(GAL)变异株,从培养的环境因素和培养基组分两方面优化了固态发酵(SSF)产酶条件,并进行中试生产,探讨了α-半乳糖苷酶粗制剂的性质及其在肉鸡日粮中的应用。首先建立了测定饲用青霉GAL活力的对硝基酚比色法,建议反应液pH为5.5,温度为40℃,时间10 min,比色波长405 nm。对出发菌株进行紫外线、甲基磺酸乙酯、亚硝基胍多次重复连续的诱变处理,获得产GAL活力较高的5个菌株。对菌株连续传代试验以及循环交替培养,筛选获得稳定产GAL的青霉菌株(Penicillium sp.)MAFIC-6,其基础产酶活力为147 U/g。青霉MAFIC-6合成α-半乳糖苷酶在一定程度上仍受葡萄糖阻遏,也受蔗糖、蜜二糖和棉籽糖部分诱导,说明该菌属于半组成型突变株。三角瓶和托盘SSF试验研究了影响产酶的各种环境因素。结果表明,培养基的初始适宜pH在5.5~6.5,发酵温度为26~32℃,水分宜控制在55%左右,在250 mL三角瓶中装曲量为50.7 g,培养75 h时,产α-半乳糖苷酶活力最高。托盘发酵研究了料曲温度和含水量变化规律,发现随着发酵进程,料曲内部温度可持续升高,水分则减少。对SSF培养基组分优化结果表明,苹果渣、甜菜渣、甘蔗渣部分替代麸皮时能显著提高酶产量,酵母粉和大豆粕是较好的氮源。在培养基中添加0.1%的Tween-80、Triton-100和EDTA均能显著地提高α-半乳糖苷酶产量。按四因素三水平正交设计安排试验。结果显示,豆粕、甜菜渣、硫酸铵和磷酸氢二钾各因素/水平依次为16%、4%、2%和2%时,酶活力达到172 U/g以上。保持硫酸铵含量不变,选择豆粕、甜菜渣和磷酸氢二钾的三因素/水平进行响应面分析试验。结果表明,当培养基中含豆粕19.20%、甜菜渣3.89%和磷酸氢二钾2.92%时,得到最高理论酶活力为174.98 U/g,与实验结果相符。分别在自然状态和调控状态下开展托盘SSF中间规模试验。结果表明,在自然SSF条件下,酵曲温度和含水量变化幅度较大,酵曲温度最高达到43℃,最后料曲水分损失22%,收获GAL活力为128.5 U/g;在调控状态下,通过调节曲房空气的温度和相对湿度,可以维持相对稳定的温度和含水量,酵曲高峰期温度仅维持在33.5~36.5℃,酵曲水分含量下降幅度较小。最后收获GAL活力达到166.3 U/g,比自然发酵酶活提高了29.4%。通风换气和喷无菌水是调节发酵过程中温度和水分的有效措施。GAL粗酶制剂稳定pH范围在3.5~6.5,最适温度50~60℃,在70℃以下时稳定,经过猪胃肠液仍能保持活力70%以上,金属离子影响酶活力。GAL对底物(对硝基苯酚-α-D-吡喃半乳糖苷)Km为1.38 mmol L-1,Vm为2.58 mmol L-1s-1。粗酶制剂中含有其它多种非淀粉多糖酶,在常温能稳定储存。在玉米-豆粕型日粮中添加GAL对肉鸡营养物质利用、生产性能、血清学参数利器官重量的影响进行了研究。结果表明,GAL能改善日粮代谢能水平和营养物质消化率,显著提高肉仔鸡早期生长阶段的生产性能,日粮能量与GAL添加水平间存在一定的互作效应。
其他文献
精品课程建设是国家高等教育质量改革的重要组成部分,精品课程建设离不开视觉元素的应用。本文采用网上调查的研究方法,对随机抽取的60门国家精品课程中视觉元素的应用现状进
在现代动物育种实践中,通过在分子水平上识别控制重要经济性状的遗传标记或者基因座,以便在早期或超早期直接对个体进行选择是一种极为重要的手段,也是为广大育种工作者广泛
政策性金融对林业劳动安全管理工作会产生积极的影响,我国在大力发展林业产业的同时,需要为林业劳动安全管理工作提供全方位的金融服务和支持,从当前的情况看,林业劳动安全管
提供了一种冷床倒臂下料装置的气、液缓冲控制方式,实现了倒臂下料装置平稳、快速的运行,保证了生产节奏。
由于公共服务、基础设施投资项目规模大,技术复杂,投资周期长,招标人为满足项目需要,近年来多采用联合体投标。在分析投资项目联合体组成形式的基础上,以某景观亮化项目为例,
摘要:本文从文科实验的现状出发,初步探讨了培养文科创新人才的实验教学模式:合理分配理论教学与实验教学的课时、突出学生的主体地位、自主式的开放实验课程、多样化的实验考核方式、实验课程管理以及实验教学课程化管理。  关键词:实验教学;创新;教学模式;课程管理    高等学校培养人才的教学体系包括理论教学和实验教学两部分,在我国的教学体系中,实验教学一直处于从属地位,没有完整的教学体系。近年来,国家各级
湖南涉外经济学院于2016年获得教育部批准新设本科层次的投资学专业,主要培养投资学应用型人才,既需要立足于湖南涉外经济学院即将展开的投资学教学的实践,又需要贯彻学校教
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
猪2型圆环病毒(PCV2)是近年来新发现的动物病毒之一,该病毒与猪的多种疾病综合征有关,特别是仔猪断奶后多系统衰竭综合征,该病最早于1991年在加拿大西部发现,其临床症状主要
本文研究了牛肉的物理特性及品质的检测方法,并进行了牛肉的物理特性与品质之间的相关性研究。为探寻牛肉组织导电特性的变化规律,本文对牛肉的复阻抗频率谱进行了研究,实现