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背景胃癌作为世界上高发的恶性肿瘤之一,其发病率在所有恶性肿瘤中位列第四,在恶性肿瘤相关致死率中位列第二。我国是胃癌高发区,发病率明显高于世界平均水平。目前胃癌的发生发展机制尚不明确,影响了胃癌诊治水平的进一步提高。水通道蛋白家族(AQPs)属于膜内在蛋白家族,其单体大小约30kDa,主要生理功能为跨膜被动转运水分子以及甘油、尿素等小分子。自1988年首次发现来,在哺乳动物中已发现水通道蛋白家族共有13位成员:AQP0～AQP12。AQPs主要分为三类:(1)传统水通道蛋白:选择性水分子通道,包括AQPO,1,2,4,5,6,8。最新研究发现AQP6和AQP8也参与阴离子、氨以及过氧化氢(H202)的转运;(2)水甘油通道蛋白:可转运水分子以及不带电荷的小分子溶质,如甘油、尿素以及其他小分子溶质,包括AQP3,7,9,10;(3)非传统水通道蛋白:主要在胞内发现,具有更少的序列同源性且渗透功能尚且未知。这13种蛋白质具有不同的分子量,27kDa(AQP8)～37kDa(AQP7),且在细胞和组织中的表达具有时空多样性,对水分子的通透能力也各不相同。AQP3在人体的多种组织中存在表达,尤其在消化道粘膜细胞中具有一定的表达丰度,这也成为其影响消化道相关疾病发生发展的基础。多种体内体外实验已证实AQP3与消化道肿瘤的增殖相关,且其可通过相应的信号通路影响肿瘤细胞的侵袭转移能力。已有研究报道AQP3的过表达可促进结直肠腺癌细胞的转移。目的探究水通道蛋白3(AQP3)对胃癌细胞的增殖与凋亡的影响;研究其中可能的分子机制。方法1.通过RT-PCR、Western-blot分别从转录水平以及蛋白质水平研究胃癌细胞株HGC27、MKN45、SGC7901、MGC803、BGC823、AGS 以及人胃粘膜细胞GES-1中AQP3表达水平。2.使用小干扰RNA(siRNA)技术构建AQP3低表达细胞株:SCG7901siAQP3、BGC823siAQP3。3.应用CCK8细胞增殖实验检测干扰AQP3后胃癌细胞增殖能力。4.通过流式凋亡实验检测干扰AQP3后胃癌细胞的凋亡水平。5.在AQP3低表达细胞株中检测自噬水平,并使用共聚焦显微镜观察自噬小体数目表化。结果1.与正常胃粘膜细胞相比,胃癌细胞株中AQP3表达水平显著增高。2.干扰AQP3后胃癌细胞的凋亡水平显著上升。3.干扰AQP3后胃癌细胞的增殖能力显著下降。4.干扰AQP3后胃癌细胞的自噬水平显著降低、自噬小体产生数量明显降低。结论AQP3在胃癌细胞中高表达,干扰AQP3可通过降低自噬水平促进细胞凋亡,进而抑制胃癌细胞增殖,揭示AQP3具有成为胃癌治疗分子靶点的潜能。