DACH1在支气管哮喘气道炎症中的作用研究

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目的:检测DACH1在哮喘气道上皮细胞及炎症细胞中的表达水平,探讨DACH1在哮喘中的作用。方法:采用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠哮喘模型,动物肺功能仪检测小鼠气道阻力,HE染色观察肺组织炎症程度,PAS染色观察气道黏液的分泌情况,肺泡灌洗液(BALF)的白细胞总数及分类计数,验证小鼠哮喘模型是否成功建立。免疫组织化学染色观察DACH1在肺组织中的表达情况。免疫荧光染色明确DACH1在炎症细胞的定位和表达。通过收集、培养10例正常对照者和5例哮喘患者BALF中的巨噬细胞,并用10%哮喘病人血清培养24h(体外模拟哮喘微环境,致敏巨噬细胞),提取mRNA,用Real time PCR检测DACH1 mRNA的表达。结果:1.哮喘组小鼠气道阻力高于正常组;哮喘组肺组织气道血管周围炎症细胞浸润明显,黏液分泌增加;哮喘组BALF中的白细胞总数及嗜酸性粒细胞明显增多。因此,建立小鼠哮喘模型成功。2.免疫组织化学染色显示,DACH1主要在气道上皮细胞及气道血管周围的炎症细胞中表达;哮喘组和对照组气道上皮细胞DACH1的表达无明显差异。免疫荧光显示,DACH1在巨噬细胞和T淋巴细胞中均有表达,以巨噬细胞为主;同时DACH1在哮喘组小鼠巨噬细胞中表达升高。3.正常对照者BALF中巨噬细胞用哮喘病人血清培养后,DACH1 mRNA的表达增加,差异有统计学意义;哮喘患者BALF中巨噬细胞用10%哮喘病人血清培养后,DACH1 mRNA的表达增加,但由于标本例数限制(n=5),没有统计学意义。结论:1.DACH1在气道上皮细胞及巨噬细胞、T淋巴细胞中表达,以巨噬细胞为主。2.DACH1在哮喘组巨噬细胞中的表达增加,提示DACH1可能通过调节巨噬细胞的功能,参与哮喘气道炎症的调控。
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