海水贝类具较高的经济价值,其养殖已成为我国海水养殖业的支柱产业。近年来,海水养殖贝类大规模死亡事件频繁发生,急需建立稳定的贝类细胞培养体系,从细胞和分子水平研究病原体及其致病机理,从而有效检测、预防疾病的发生。细胞培养便于开展细胞工程育种技术,培育出抗逆能力强的新品种,也是解决病害防治的手段之一。贝类种质资源丰富,其细胞系的建立将有助于遗传资源的长期保存。此外,随着环境污染的加剧,贝类作为敏感生物的指示作用也日益凸显。本研究以我国北方沿海重要水产养殖贝类栉孔扇贝为研究对象,进行细胞培养的研究,旨在建立一套栉孔扇贝组织细胞体外长期培养方法,为免疫学研究、病原体侵染机制研究、物种保护、遗传育种、环境监测等搭建平台,并最终为栉孔扇贝细胞系的建立构建基础。栉孔扇贝心肌组织原代培养单因子条件优化结果显示,基本培养基L-15能够最大化促进植块细胞迁出及较长时间维持细胞体外存活,L-15+M199次之,M199效果较差;5%FBS能够最大化促进植块细胞迁出及较长时间维持细胞体外存活,10%FBS次之,15%及20%FBS效果较差。在基本培养基L-15、5-10%FBS培养条件下,细胞平均存活2周左右,部分细胞可维持50d。体外培养的心肌细胞具活跃的收缩现象,细胞单层处可形成肌管及肌丝结构。超微结构显示培养10d后的心肌细胞中肌原纤维局部存在,培养更长时间的心肌细胞中肌浆网膨大为若干空泡。随着培养,细胞琥珀酸脱氢酶活性逐渐减弱,而碱性磷酸酶活性相对稳定。以L-15为基本培养基,添加不同浓度的FBS、牛磺酸、Ca²⁺,正交实验结果显示,5%FBS利于植块细胞迁出,血清浓度越高,细胞迁出效果越差。5%FBS与各浓度牛磺酸组合可以显著延长细胞存活时间1-2周;高浓度牛磺酸（50mM）效果更加显著,细胞存活较低浓度牛磺酸（5mM、20mM）组延长10-30d左右,部分心肌细胞可以维持正常生长状态达60d以上。20%FBS与各浓度牛磺酸组合的实验组中,多数细胞存活2周左右,部分心肌细胞可存活1个月左右,且这些细胞多表现为体积增大,胞质中含有大量的颗粒;在该类组合的高浓度牛磺酸（50mM）实验组中,部分细胞具较高的琥珀酸脱氢酶活性,观察到疑似部分分裂末期细胞,以及发育早期细胞的增殖现象,但随着培养细胞逐渐分化,最终出现空泡而退化,培养共维持41d。本文首次利用慢病毒表达载体介导的方法,尝试将SV40LT导入栉孔扇贝原代培养第3d心肌细胞,感染后10d左右未观察到明显的细胞增殖。SV40LT转导栉孔扇贝心肌组织原代培养细胞各种实验条件仍需进一步优化。