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草菇(Volvariella volvacea(Bull.ex Fr.)Sing.)产量丰富,在全球大多数热带季亚热带国家都可以对其进行广泛地种植,并且,草菇不仅味道受到世界各地人民的喜爱,也具有保健功能,可作为药材使用,所以对草菇的研究与开发一直受到广泛地关注。本研究就以草菇的子实体为原材料,对草菇子实体中甾醇类化合物的提取工艺进行了优化,并且通过优化所得到的工艺参数对草菇子实体的小分子化合物进行提取、分离、纯化和结构鉴定。选取纤维素酶进行有效成分的提取,并在单因素实验的基础上,结合响应面实验,采用磷硫铁法对提取物中的甾醇类化合物进行含量测定,并以甾醇类化合物的提取率为指标对草菇中甾醇类成分的提取工艺进行优化,实验证明最佳的提取工艺为提取温度64.75℃、酶提取浓度8.46 mg/ml、反应系统p H 4.4,此时甾醇类化合物的提取率为1.401%。将草菇子实体的乙醇提取物通过硅胶柱层析法、凝胶柱层析法及高效液相色谱法等多种方式进行分离,按其极性和分子量的大小不同而达到分离的目的,从草菇子实体中分离鉴定出7个化合物的分子结构,分别为麦角甾醇(ergosterol)(1)、3β-羟基-5α,8α-环氧麦角甾-6,22-二烯(3β-hydroxy-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-diene)(2)、N-苯乙基-2-甲酰基-5-羟甲基吡咯(N-phenethyl-2-formyl-5-hydroxymethylpyrrole)(3)、5,8-环二氧基-5α,8α-麦角甾-6,9,22E-三烯-3β-醇(5,8-Epidioxy-5α,8α-ergosta-6,9,22E-tien-3β-ol)(4)、5α,6α-环氧-(22E,24R)-麦角甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(5α,6α-epoxy-(22E,24R)-ergosta-8(14),22-diene-3β,7α-diol)(5)、3-异丁基六氢吡咯并[1,2-α]吡嗪-1,4-二酮(3-isobuty-lhexahyd ropyrrolo[1,2-α]pyrazine-1,4-dione)(6)、3-(仲丁基)六氢吡咯并[1,2-α]吡嗪-1,4-二酮(3-(sec-butyl)hexahydropyrrolo[1,2-α]pyrazine-1,4-dione)(7)。