目的：利用分子生物学的方法，检测非小细胞肺癌组织与其相应远、近癌旁组织p16基因甲基化的差异，确定肿瘤的分子靶区，用来指导精确放疗靶区的设计，探讨这种方法的可行性以及临床价值。方法：选取33例肺部疾病住院病人手术切除的病变肺组织和相应的病变旁组织为标本，其中29例为肺癌，4例为良性肺部疾病。标本经特殊方法取材、冻存，然后提取DNA，完成DNA甲基化的修饰并进一步纯化，再进行甲基化特异性聚合酶链反应扩增目的基因，所得产物经琼脂糖电泳，溴化乙啶染色，在凝胶成像分析仪下观察。结果：29例肺癌组织标本中，12例(41.4％)在p16基因启动子区域呈现异常甲基化，其中腺癌为6例，鳞癌3例，细支气管肺泡癌2例，腺鳞癌1例。在肺癌组织相应的近癌旁和远癌旁组织标本光镜下未见有肿瘤细胞存在。肿瘤组织与癌旁组织的甲基化有显著性差异(P＜0.05)。在肺癌组织相应的近癌旁和远癌旁组织标本中未检测出甲基化存在。在良性组织标本中未检测到甲基化存在。甲基化状态与肿瘤的低分化可能相关(P=0.05)。甲基化状态与肿瘤的大体类型、组织类型、分期无显著差异(P＞0.05)。结论：甲基化特异性聚合酶链反应技术对肺癌病人标本中的p16基因异常甲基化检测具有特异性，可进一步应用于肺癌生物靶区设计的探讨。