结节性淋巴细胞为主型与富于淋巴细胞的经典型霍奇金淋巴瘤的临床病理、免疫表型及克隆性研究

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[背景和目的]NLPHL和LRCHL是两种不同的临床病理实体,二者均来自于Rye分类中的淋巴细胞为主型,形态学上相似,但近年来的研究表明二者具有不同的免疫表型和临床特点。关于二者的鉴别诊断,目前已有报道B细胞转录因子BSAP,BOB.1和Oct-2的表达有一定帮助。关于NLPHL各结节内肿瘤细胞是否来自同一克隆的B细胞则有着不同的意见。本研究对我院诊断的28例NLPHL和25例LRCHL进行回顾性研究,并在两者之间进行比较,以探讨其临床特点、病理表现、免疫表型、与EB病毒的关系等资料,以寻找对两者鉴别诊断有用的标记。并对NLPHL不同结节中肿瘤细胞的克隆性进行初步探讨。[材料与方法]本课题收集四川大学华西医院病理科1996年2月~2007年2月共11年间存档资料28例NLPHL和25例LRCHL。对有蜡块资料的病例进行免疫组化染色和EBER1/2原位杂交。免疫组化选用的标记有LCA、CD20、CD30、CD15、CD57、CD79α、EMA、BSAP、BOB.1、Oct-2、CD3ε、CD45RO、CD10和bcl-6。并对其中一例NLPHL应用显微切割和PCR技术检测两个不同结节内肿瘤细胞的IgH基因重排并测序,以探求其是否来自同一B细胞克隆。[结果] (1)病理表现:28例NLPHL中,23例(82.1%)呈单纯的结节性生长模式,5例(17.9%)呈结节性+弥漫性生长模式。1例(3.6%)可见到残存生发中心。1例(3.6%)可观察到PTGC改变。未观察到合并DLBCL或随后发生DLBCL的病例。所有NLPHL病例均可观察到L&H细胞。25例LRCHL中,15例(60.0%)呈单纯的弥漫性生长模式,6例(24.0%)呈弥漫性+结节性生长模式,4例(16.0%)呈单纯的结节性生长模式。9例(36.0%)可见到残存生发中心。所有LRCHL病例中均可观察到H/R-S细胞。(2)免疫表型、EB病毒检测:NLPHL中L&H细胞的阳性反应如下:LCA 18/18(100%),CD20 24/25(96.0%),CD30 4/24(16.7%),CD15 0/24(0%),CD79α18/21(85.7%),EMA 10/21(47.6%),bcl-6 9/19(47.4%)。进行B细胞转录因子BSAP、BOB.1和Oct-2染色的病例的L&H细胞均为阳性(21/21,100%),CD57~+的花环见于10/21(47.6%)。EBER~+的L&H细胞见于1/21(4.8%)。LRCHL中H/R-S细胞的阳性反应如下:LCA 0/14(0%),CD20 6/17(35.3%),CD30 18/18(100%),CD15 10/18(55.6%),CD79α3/15(20.0%),EMA 0/15(0%),bcl-6 0/14(0%)。BSAP、BOB.1和Oct-2在H/R-S细胞中的阳性反应分别见于13/14(92.90)、2/14(14.3%)和12/14(85.7%)。EBER在H/R-S细胞中的阳性反应见于11/14(78.6%)。肿瘤细胞周围没有CD57~+的花环。(3)临床特点:NLPHL占同期诊断的所有HL的3.5%(28/798),LRCHL占3.1%(25/798)。NLPHL组中位年龄37岁,LRCHL组中位年龄33岁。男女比前者2.5:1,后者4:1。两组发病部位均以颈部淋巴结为主(75.0%v.s.84.0%)。20例NLPHL中16例(80.0%)为Ann ArborⅠ~Ⅱ期。而14例LRCHL中10例(71.4%)为Ann ArborⅠ~Ⅱ期。NLPHL组五年生存率高于LRCHL组(81.4%v.s.57.1%),但差异无统计学意义。(4)克隆性:使用激光显微切割和PCR技术,在1例NLPHL的两个不同结节中L&H细胞均检测出80bp~100bp大小的IgH基因克隆性重排,提示存在B细胞的克隆性增生,但测序结果表明两者具有不同的基因序列。[结论] (1)相比LRCHL,NLPHL中结节性生长方式更为常见。(2)NLPHL中L&H细胞多呈LCA+,CD20+,CD30-,CD15-,CD79α+,EMA+,BOB.1+,bcl-6+,EBER-,而LRCHL中H/R-S细胞多呈LCA-,CD20-/+,CD30+,CD15+,CD79α-/+,EMA-,BOB.1-,bcl-6-,EBER+。CD57阳性的花环见于NLPHL,而在LRCHL中不出现。Oct-2对于NLPHL和LRCHL的鉴别诊断没有意义。(3)在1例NLPHL病例的不同结节中的L&H细胞存在IgH基因克隆性重排,但具有不同的序列,提示其可能来自不同的B细胞克隆,但由于例数较少,还需要进一步研究。
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