Zyflamend对实验性口腔癌抑制作用的研究

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炎症早已被认为与多种癌症的发生发展有相关性。口腔鳞状细胞癌的发生也与口腔的长期慢性炎症有关。在众多炎症介质中,花生四烯酸代谢产物前列腺素(prostaglandin,PG)E2和白三稀(1eukotriene,LT)B<,4>与结肠癌和食道癌等多种肿瘤发生有明确的因果关系。Zyflamend是具有抗炎活性的天然植物混合制剂。本实验采用DMBA诱发的金黄地鼠口腔癌模型和人舌鳞癌细胞系Tca83,观察不同浓度Zyflamend在不同时间对口腔癌的抑制作用,并对其作用机制进行了初步探讨,得到以下结果: 1.Zyflamend对DMBA地鼠模型早期炎症的影响27只雄性,6-8周龄金黄地鼠。3只不涂药作为阴性对照,其余24只于金黄地鼠左侧颊囊涂0.5﹪DMBA,每周3次,共涂3周。3周后随机分为4组,阳性对照组不涂药,其余3组地鼠于左侧颊囊分别涂低、中、高浓度Zyflamend,稀释比例为1:3、1:1和原液,每周涂3次。第4周末实验结束处死动物,取大部分左侧颊囊进行组织病理学观察和BrdU免疫组化染色。另一小部分组织冰冻在液氮里,用来测定PGE2和LTB4的水平。结果与阳性对照组相比,高浓度Zyflamend组抑制了单纯增生、异常增生灶的数目(P<0.05);低、中、高浓度Zyflamend处理后,每平方毫米炎症细胞的数目显著减少(P<0.01);中、高浓度Zyflamend组BrdU增殖指数显著降低(P<0.05);与阳性对照组相比,低、中浓度Zyflamend组的PGE2水平未见明显差异(P>0.05),高浓度Zyflamend组PGE2水平显著升高(P<0.05),低、中浓度Zyflamend组的LTB4水平显著降低(P<0.05),高浓度Zyflamend组LTB4水平显著降低(P<0.01)。 2.Zyflamend对DMBA诱发的金黄地鼠口腔癌的抑制作用116只金黄地鼠,10 R设为阴性对照,其余用0.5﹪的DMBA石蜡油涂于地鼠左侧颊囊,每周3次,共涂6周。从第7周开始分别给地鼠左侧颊囊局部涂抹中、高浓度Zyflamend,每周3次,连续18周。第24周末实验结束处死动物,取左侧颊囊进行组织病理学观察和BrdU免疫组化染色。通过局部应用中、高浓度Zyflamend,肉眼肿瘤发生率从86.7﹪(26/30)分别下降到53.6﹪(15/28,P<0.01)和50.0﹪(14/28,P<0.01)。鳞状细胞癌的发病率分别从86.7﹪(26/30)下降到78.6﹪(22/28,P>0.05)和64.3﹪(18/28,P<0.05)。Zyflamend高浓度组的单纯增生、轻-中度异常增生、重度异常增生和癌的病变中,BrdU的增殖指数显著降低(P<0.05)。 3.Zyflamend对人舌鳞癌细胞系Tca83的增殖和诱导凋亡的影响采用MTT方法和Annexin V-FITC/PI染色方法。结果0.1、0.5、1μl/mlZyflamend对Tca83细胞增殖有明显的抑制作用,随着Zyflamend浓度增大,抑制作用逐渐增强,呈一定浓效关系。24h和48h时,0.1μl/ml Zyflamend诱导Tca83细胞凋亡率未见明显增加(P>0.05);0.25μl/ml Zyflamend诱导Tca83细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。 研究结果显示Zyflamend对DMBA地鼠模型早期炎症有一定的影响,可以减少炎症细胞数目和抑制细胞增殖,其作用机制可能与其抑制花生四烯酸代谢5-Lox通路降低LTB<,4>水平有关;Zyflamend显著降低了金黄地鼠口腔癌的发生率,对口腔癌具有一定的化学预防作用;Zyflamend能够抑制人舌鳞癌细胞系Tca83的增殖,诱导Tca83细胞凋亡。
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