大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)属于一种危害十分严重致病菌,而且从传播途径上来看,它属于食源性致病菌,极易造成人体感染,感染后的症状通常是引起腹痛腹泻、出血性结肠炎、溶血性尿毒综合症等,严重者甚至可导致死亡。由于大肠杆菌O157:H7的感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性等特点,目前在全球范围内该菌已经成为了公共卫生安全的关注重点,我们国家则把大肠杆菌O157:H7列为重点防控的病原微生物之一,其重要性不言而喻。相较于传统的细菌学的培养以及菌落形态上的鉴定,不但操作步骤多,培养时间长,且对早期的准确的诊断和鉴别有一定的影响。那么,最近由于对人们对大肠杆菌O157:H7的关注度不断上升,一些简单、高效、及实用的方法也陆续被报道。目前,一个大的趋势是建立快速、特异的检测方法,这个直接影响着早期疫情的诊断及控制。本研究从多个方面对大肠杆菌O157:H7进行了微生物特性鉴定、定性并建立了多重聚合酶链式反应(PCR)以及运用其技术进行检测研究,还对实际样品进行了分析。本文首先对大肠杆菌O157:H7进行微生物学培养和检测,了解大肠杆菌O157:H7的基本生物学特性,包括它的传播途径、致病机制、检测方法等。然后在试验过程中,采用山梨醇麦康凯培养基(SMAC),通过菌落形态初步鉴定大肠杆菌O157:H7。接着根据已有的经验,针对其特异性致病基因stx1,stx2和特异性鞭毛基因flic,分别设计3对引物,建立多重PCR反应体系。最终试验结果结果表明上述3对引物均可以同时进行有效扩增,且特异性良好,进一步加大了结果的准确度。随着人们食品安全意识的逐步提高,建立快速、特异的大肠杆菌O157:H7检测方法具有较大的实际意义。农贸市场处于食品的流通环节中,该环节也与人们的生活息息相关,因此,利用本文所研究的方法,对武汉市辖区内的10个农贸市场的猪肉样品进行了抽样检测,共检测样品60份,发现阳性结果1份,并对阳性结果产生的原因进行了简要分析。本方法可满足大批量的检测需求,且分析速度快,成本低,特异性高。