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肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)在我国恶性肿瘤发病率中位居第二，具有发展快，转移早，预后差等特征，其发生发展是一个多因素参与、分多个阶段的复杂过程。目前复发与转移仍是影响其疗效的主要原因。因此，进一步揭示HCC发生发展的分子机制已成为当前研究的热点。β-连环蛋白(β-catenin)基因是近年来发现的一种新原癌基因，其编码产物β-catenin是Wnt信号传导通路下游的一个关键成份，Wnt信号异常激活可使胞浆内游离β-catenin降解障碍，大量集聚，并进入核内与T细胞因子(Tcell factor，Tcf)／淋巴增强子(Lymphoid enhancer factor，Lef)家族转录因子结合，激活下游靶基因C-myc，cyclinD1等，诱发肿瘤的形成。另一方面β-catenin作为E-钙黏素／连环蛋白(E-cad／catenin)复合体重要组份，与肿瘤浸润转移也有密切关系。E-cad是迄今发现的最重要黏附分子之一，广泛分布于胚胎和成熟组织上皮细胞中，E-cad细胞内段可通过catenin与细胞骨架的肌动蛋白微丝连接，从而构成结构完整的Cad相关复合物介导同型细胞间的黏附。该复合体中任一组份发生功能障碍，都会导致细胞间的黏附丧失，从而使细胞具有侵袭性。近年来，已发现许多人类肿瘤细胞中存在β-catenin与E-cad异常表达，但有关二者在肝细胞癌中的研究国内尚未见报道。本实验采用免疫组化方法对56例HCC中β-catenin及E-cad的表达进行观察，目的在于探讨二者与HCC的关系，二者之间的相关性及其临床意义。郑少“人学2004届硕」学位沦文{，一连环蛋白’J七一仍私索乙.刀「细胞癌中的农达及总义材料与方法 肝细胞癌手术切除标本56例，34例带癌旁组织。其中男性38例，女性18例。年龄29一70岁，平均50.5岁。血清AFP阳性者40例(放免法>400n岁ml为阳性)，占71.4%。HBsAg阳性者36例，占643%。肿瘤直径续scm者21例， >sem者35例，平均直径7.sem。按照Edmondson一steiner分级标准，I级5例，11级17例，111级24例，IV级10例。包膜完整者21例，无包膜及包膜受浸润者35例，有癌栓形成者19例。根据临床病理资料将标本分为高侵袭性转移组和低侵袭性转移组，凡符合以下标准之一者，归为高侵袭转移组:(1)门静脉有癌栓。 (2)同一肝叶主癌灶周围肿瘤数大于2个或多个小卫星结节或伴有包膜受侵破坏。(3)肝门部淋巴结有转移者。56例HCC中，高侵袭性转移组35例，低侵袭转移组21例。所有患者术前均未行放疗，化疗，肝动脉栓塞及免疫治疗等。5例外伤性肝破裂手术切除标本作为正常对照。使用鼠抗人p一catenin及E一cad单克隆抗体行免疫组化S一P(streptavidin一Peroxidase)法染色，染色结果分别按Maruyama和Kanai方法判断。实验数据经SPSslo.0统计软件包进行统计学处理，计数资料比较用xZ检验或Fishe:确切概率计算法，相关分析采用列联表的xZ检验，以a=0.05为显著性检验水准。结果1 .p一catenin正常表达为胞膜表达，异常表达方式包括胞膜减弱表达，胞浆或胞核异位表达。2.5例正常肝组织和34例癌旁组织p一catenin均为细胞膜阳性着色，56例HCC中p一catenin异常表达率71.4%(40/56)，其中胞膜减弱表达率为51.5%(29/56)，异位表达率为66%(3 7/56)。3.p一eatenin表达与HCe患者年龄、性别、^FP、HBsAg及肿瘤大小均无关 (P>0.05)。在HCC高分化组和低分化组中p一catenin异位表达率分别为45.5% (10/22)和79.4%(27/34)，两组t匕较差异有统计学意义(P<0.01)。日一eatenin胞膜减弱表达率在有包膜破坏或癌栓形成组明显高于包膜完整、无癌栓组(尸<0.05)。在高侵袭转移组和低侵袭性转移组中p一catenin异常表达率分别为82.9% (29/35)和52.4%(11/21)，两组l’d」差异有统计学意义(P<0.05)。4.E一cad在正常及癌旁肝红l织呈胞膜强阳性着色，56例HCC中E一cad减弱表达郑州人学2004届硕上学位论文p一连环蛋白’，E一钙勒素在肝细胞编中的表达及意义率为44.6%(25/56)。5.E一cad在HCC肿瘤直径大于scm者及小于scm者的减弱表达率分别为57.1% (20/35)和23.8%(5/21)，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在HCC高分化组E一cad胞膜减弱表达率为27.3%(6/22)，明显低于低分化组的55.9%(1 9/34) (P<0.05)。有癌栓组E一cad减弱表达率为73.7%(1 4/19)，与无癌栓组的29.7% (n/37)相比较，差异有统计学意义(尸<0.01)。高侵袭转移组与低侵袭性转移组的E一cad减弱表达率间亦有显著性差异(尸<0.01)。E一cad表达与HCC患者年龄、性别、AfP、HBsAg、有无包膜均无关(尸>0.05)。6.p一catenin胞膜减弱表达与E一cad异常表达呈正相关性(尸二a007，r二a了分)，p一eatenin异位表达与E一ead异常表达无相关性(P=0. 159，r二0.188)。结论1.p一catenin在.HCC中呈异位表达和胞膜减弱表达，可能参与了HCC的发生发展过程。2.p一catenin异常表达与HCC病理分级，有无癌栓、包膜有关，可以作为判断HCC恶性程度、侵袭潜能的参考指标。3.E一cad在HCC表达下调，并与肿瘤直径、病理分级、有无癌栓有关，说明E一cad可抑制HCC侵袭转移，并能间接判断预后。4.E一cad异常表达与p一catenin胞膜减弱表达呈正相关，提示二者在HCC发?