实验背景和目的 体内回输免疫活性细胞的过继免疫疗法,是继手术,化疗和放疗后的第四大肿瘤治疗手段。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)是由多种细胞因子诱导的杀伤细胞,是一类能够高效非特异性地杀伤肿瘤细胞的免疫活性细胞,这种杀伤作用是非MHC限制性的,且具有易于体外培养增殖、毒副作用小等优点,被认为具有良好的临床应用前景。但是,目前临床研究使用的CIK细胞扩增数量不够稳定,且杀伤活性不够理想。因此,如何进一步提高CIK细胞的增殖倍数和杀伤活性,对于提高临床疗效具有重要意义。以串联方式携带人野生型p53、B7-1和GM-CSF三基因的重组腺病毒载体(p53-GM-CSF-B7-1-AdV),命名为BB-102,转染喉癌细胞Hep-2,能从多个环节控制肿瘤的发生和发展,其中P53是多年来倍受人们关注的一种抑癌基因,GM-CSF在抗原提呈细胞(APC)的成熟中发挥重要作用,B7-1与T细胞表面的CD28结合能诱导IL-2等淋巴因子的分泌,并防止特异性肿瘤抗原的免疫耐受,是决定第一信号能否产生T细胞功能性激活的关键因素。我们认为以该肿瘤疫苗与CIK细胞共培养有可能诱导出特异性抗肿瘤免疫。本研究旨在通过BB-102转染Hep-2细胞所制备的瘤苗诱导CIK细胞的特异性免疫反应,以提高CIK细胞杀伤活性,以期提高CIK细胞的临床疗效,为肿瘤过继免疫治疗提供一种新型临床治疗方案。 实验方法 以BB-102转染Hep-2细胞,在高水平表达B7-1的Hep-2细胞中加人丝裂霉素C(MMC)使其处于抑制增殖状态,制成瘤苗后与CIK细胞共