去甲肾上腺素对在体小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发性复杂峰电位的影响

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[目的]肾上腺素受体广泛分布于小脑皮层,给予去甲肾上腺素米(norepinephrine,NE)或者活化蓝斑核(locus coeruleus,LC)能够减少小脑皮层浦肯野细胞(Perkinje cell,PC)自发性简单峰电位(simple spike,SS)的活动,我们已经报道了 NE能够通过增强分子层中间神经元的抑制性传入和平行纤维的兴奋性传入来双向性调节PC的SS,然而,NE对在体自发性复杂峰电位(complex spikes,CS)的影响还不清楚。本实验通过电生理学和药理学方法在乌拉坦麻醉小鼠研究NE对小脑皮层PC的自发性CS的影响。[材料与方法]1.实验动物的准备用乌拉坦(1.3g/kg)腹腔注射麻醉动物。行气管插管后,通过耳棒及嘴部固定器,将动物固定在自制、在体实验动物记录架上。剪开头部皮肤及肌肉,暴露颅骨。在准备记录区周围制作灌流槽。行开颅术,小心去除硬脑膜后,用充氧的人工脑脊液(artificial cere-brospinal fluid,ACSF)灌流脑表面,同时,用体温维持仪将体温控制在37±2℃。2.电生理记录采用膜片钳的贴附式记录方法记录小鼠小脑皮层Vermis和Crus Ⅱ区PC的自发性活动,通过自发性活动具有SS和CS的特征来判断记录的是否是PC。3.药理学研究小脑表面通过蠕动泵灌流给药方式,给予NE及其阻断剂,观察药物引起的PC活动变化。4.统计分析电生理学数据是用Clampfit 10.4软件来进行分析的,数据显示为均数±标准误来。使用分析软件SPSS的标准t检验和单因素方差分析来进行数据分析。P<0.05表示均数间有有意差。[结果]1.NE对PC自发性CS的放电活动频率没有影响(对照100±18.25%,给药94.99±24.97%)(P<0.05)。2.NE可以明显减少自发性CS的小穗数目(对照100±3.48%,给药75.96±6.70%)(P>0.05),不影响CS小穗的瞬时频率(对照100.01±0.63%,给药 100.15±0.77%)(P<0.05)。3.NE不影响CS的振幅(对照 100.32±1.53%,给药99.91±0.90)(P<0.05),但是却明显减少CS的曲线下面积(AUC,对照100.23±1.05%,给药78.16±2.06%)(P>0.05)。4.NE能够明显延长CS引起的放电暂停的时间(对照100±4.77%,给药266.46±30.21)(P>0.01)。5.肾上腺素α受体阻断剂酚妥拉明能够完全阻断NE对PC自发性CS放电活动的影响。[结论]本项研究表明NE不仅减少PC的自发性SS的活动,同时,也能通过肾上腺素α受体影响PC自发性CS的放电活动,提示LC的NE神经元可以调节下橄榄核(inferior olive,IO)来的爬行纤维对PC的控制能力。
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