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目的:向HL-60柔红霉素耐药细胞转入miRNA-27a和反义miRNA-125b模拟体,观察这两种模拟体对HL-60细胞柔红霉素(DNR)耐药性的影响。方法:1.用小剂量DNR诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60一个月,使之产生DNR耐药性;2.用脂质体Endo Fectin TM-MAX将miRNA-27a和反义miRNA-125b模拟体(mimic)以及阴性对照(N.C.)转入HL-60 DNR耐药细胞中;3.孵育48小时后用倒置荧光显微镜观察细胞状态,用RNA提取试剂盒(RNAiso Plus,Ta Ka Ra)提取RNA,用miRNA引物、和All-in-One?miRNA qRT-PCR试剂盒(Gene Copoeia TM公司)对转染效果进行实时荧光定量RT-PCR验证;4.用诱导剂量的DNR作用于转入上述miRNA模拟体的HL-60耐药细胞,并分别于加药后48和72小时进行MTT试验,观察这些细胞对DNR的耐受性是否发生改变;5.用SPSS17.0对实验结果进行统计分析。结果:1.HL-60 DNR耐药细胞的产生:小剂量DNR对HL-60细胞用药后的前3天在显微镜下观察到大面积细胞碎片,细胞大量死亡,但连续作用一个月后,未观察到大片的细胞碎片,细胞生长状况良好,证实HL-60细胞对DNR已产生耐药;2.荧光显微镜下转染效果的判定:转染miRNA模拟体的HL-60 DNR耐药细胞孵育48小时后,于倒置荧光显微镜下可观察到大片的荧光,表明miRNA模拟体复合物已大量转入细胞内;3.miRNA实时荧光定量PCR的检测结果:与阴性对照(N.C.)相比,HL-60 DNR耐药细胞内miRNA-27a和反义miRNA-125b模拟体含量显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。4.MTT结果:与阴性对照相比,DNR对转染miRNA-27a模拟体的HL-60 DNR耐药细胞的抑制率显著升高(P<0.05),而对转染反义miRNA-125b模拟体的HL-60/DNR耐药细胞的抑制率无明显改变(P>0.05)。结论:上调miRNA-27a的表达可降低HL-60 DNR耐药株对DNR的耐药性,而增加反义miRNA-125b的表达不能逆转HL-60 DNR耐药细胞对DNR的耐药性。