烟草青枯病是烟草生产中最严重的细菌性病害,选育抗病品种或提高烟草自身抗病性来防治病害是最经济有效的方法。实验室前期通过烟草青枯病抗病和感病品种的转录组测序和田间试验证实,苯丙烷途径与烟草对青枯病的抗性相关,田间施用芦丁对烟草青枯病有较好的田间防治效果。本研究从12种类黄酮化合物中筛选出橙皮素对烟草青枯病具有较好的诱导抗性,并探讨了其诱导抗性机制。主要研究结果如下:1.首先在含三苯基四氮唑（TTC）的培养基上检测了12种类黄酮化合物对青枯菌的最低抑菌浓度,结果表明,黄酮、橙皮素等5种类黄酮MIC为2 m M。以苯并噻二唑（BTH）为对照,通过室内盆栽试验评价了12种类黄酮应用灌根和喷雾两种方式对烟草青枯病的诱抗效果。结果表明,喷雾处理的防治效果低于灌根诱导方式,其中橙皮素和黄酮灌根对烟草青枯病诱抗作用防效最好,室内盆栽防效分别达到51.74%和40.10%,显著高于BTH处理。田间防效试验结果表明:1 m M橙皮素和黄酮灌根处理后对烟草青枯病的最佳防治效果分别达到63.04%和51.82%。橙皮素灌根处理烟株的农艺性状指标、烟叶化学成分含量与清水对照差异显著,烟株株高和最大叶面积均显著增加,中部烟叶烟碱、总氮、钾离子含量升高,糖碱比下降,综合性状表现优于黄酮处理。橙皮素灌根处理烟株单位面积产量、产值和均价均显著高于BTH处理,增幅分别为5.99%～7.69%,12.82%～19.49%和9.48%～12.71%。2.从生理生化、转录组和代谢组水平探讨了橙皮素对烟草青枯病的诱导抗性机理。对橙皮素处理2 h～72 h内的烟草叶片进行了活性氧、防御酶、可溶性蛋白、酚类和类黄酮含量的测定,结果表明:橙皮素处理后烟叶可溶性蛋白含量呈缓慢下降趋势,在2 h～72 h均显著高于仅接种青枯菌的烟株,烟草叶片H2O2和O2-的积累量在接种青枯菌24 h开始显著增加,其积累量分别达到接菌对照的2.3倍和1.47倍。橙皮素处理后烟草叶片SOD、POD、PPO、PAL酶活性和烟草叶片总酚和类黄酮含量比接菌对照处理显著升高,PAL、POD和SOD酶活性呈先上升后下降的趋势,其最大值分别是接菌对照的3.75、2.01、2.23倍。PPO酶活性与总酚、类黄酮含量在橙皮素处理后缓慢上升,比接菌对照和BTH处理均显著升高,说明橙皮素能通过增加烟草叶片防御酶活性与酚类代谢等生理生化反应提升烟草对青枯病抗性。对橙皮素灌根后接种和不接种青枯菌24 h的烟草根部进行了转录组和代谢组测定,代谢组分析表明,橙皮素诱导后接种青枯菌与只接种青枯菌的烟株相比对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、柚皮素、橙皮素、山奈酚、槲皮素、水杨酸等代谢物显著上调表达。转录组分析表明,类黄酮合成途径相关的C4H、4CL、CHI、OMT、Nt FLS等多个基因显著上调,与水杨酸途径的相关基因PR1、TGA、NPR1显著上调,而与茉莉酸途径相关基因JAR1、COI1、JAZ、MYC2显著下调。对转录组代谢组中的差异基因和差异代谢物进行了联合分析,结果表明橙皮素诱导水杨酸途径相关基因的表达和类黄酮物质的积累增加了烟草对青枯病的抗性。