基于分子印迹—流动注射化学发光传感器检测茶碱类物质

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茶碱类药物可放松支气管平滑肌,常用于平喘、抗炎和止咳,在药物化学上归于甲基黄嘌呤类药物。该类药物疗效显著、使用方便且价格低廉,因此在我国被广泛使用。由于茶碱类药物的有效血药浓度范围窄,治疗剂量接近于中毒剂量,血药浓度过高或静脉滴注过快容易引起副作用,甚至产生中毒。对于使用茶碱类药物的患者,特别是重症或者连续用药的患者,实时血药浓度监测极其重要。目前,国内外针对茶碱类药物的主要监测方法包括:高效液相色谱、气相色谱、紫外-可见分光光度计和毛细管电泳法等。此类检测方法技术要求高,耗材昂贵,且仪器维护成本高,难以普及应用。因此,研发低成本、易推广的新型检测技术对于治疗患者以及节约医疗资源具有重要意义。基于此,本文将分子印迹技术与流动注射化学发光联用,制成传感器,对茶碱类物质进行检测。分子印迹技术可合成出具有形状、大小和官能团都与目标分子匹配空腔的聚合物,分子印迹聚合物能实现对目标分子的专一性识别,可类比为抗体识别抗原,或酶对底物的高度选择性;化学发光是一种无须外界光源的光谱分析法,具有灵敏度高、分析速度快和仪器设备便宜等优点。传感器结合了二者的优点,同时使用流动注射技术进样,可在热力学非平衡状态下采集信号,操作简单,具有高度稳定性。结合使用两种技术可实现复杂样品中目标分子的测定,有效降低了成本,具有潜在的推广价值。本论文的研究内容主要包括以下四个方面的工作:1、使用Luminol-H2O2-NaOH-茶碱化学发光体系,对茶碱进行测定。应用流动注射技术载入试样,优化化学发光条件及各项参数,得到线性方程为?I=7×108c+230,线性相关系数(R2)为0.9963,线性范围为1×10-72×10-6mol/L,对相同浓度的茶碱溶液进行11次平行测定,得到该方法的相对标准偏差(RSD)为2.56%,测定实际样品中的茶碱能获得满意的结果。2、调整流动注射路线,优化系统参数,与KMnO4-HCHO化学发光体系联用,对氨茶碱进行测定。在5×10-41×10-33 mol/L浓度范围内,相对化学发光强度与氨茶碱存在线性关系,检出限为2×10-55 mol/L,建立的方法可用于实际样品中氨茶碱的测定。3、为了进一步提高方法的选择性,采用本体聚合法,合成二羟丙茶碱分子印迹聚合物,将合成的聚合物作为识别元件,结合Luminol-H2O2化学发光体系,制成传感器,对二羟丙茶碱进行测定。方法的线性范围为1×10-61×10-4mol/L,检出限为1×10-77 mol/L,将该方法应用于复杂样品中二羟丙茶碱的测定,结果令人满意。4、使用分子印迹-流动注射化学发光传感器测定多索茶碱。研究传感器的吸附性能,传感器能有效提高方法的选择性;优化化学发光条件,得到回归方程为?I=45.419c+345.06,线性范围为1×10-65×10-55 mol/L,检出限为1×10-77 mol/L。传感器可用于测定复杂样品中多索茶碱的含量。
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