壶瓶碎米荠多糖的生物活性初步研究

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目的:目前对于壶瓶碎米荠主要活性成分之一的多糖开发尚浅,缺少对其生物活性功能的探究。本文选用恩施地区壶瓶碎米荠作为材料,首先探究超声对壶瓶碎米荠多糖的提取量、微观结构、颜色的影响。再探究不同剂量的壶瓶碎米荠多糖(Cardamine hupingshanensis polysaccharide,CHP)对正常小鼠肠道菌群的影响及功能预测。最后研究了壶瓶碎米荠多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠的降血糖作用和对代谢物、肠道菌群的影响。方法:利用苯酚硫酸法测定多糖含量;电镜扫描观察多糖微观结构;CS-820N台式分光测色仪测定多糖色度。运用16s rRNA测定肠道内容物;UHPLC-QE-MS测定血浆中代谢物质。结果:(1)建立了超声提取动力学模型,求得相关系数在0.90以上的方程和相关参数,当提取条件达300W、353K、60min时提取量最大0.7146mg/ml;超声与水提的多糖微观结构不同,超声提取的多糖颗粒状明显;超声与水提相比L*、△E显著性增加(P<0.05),a*显著性减少(P<0.05)。(2)正常小鼠灌胃壶瓶碎米荠多糖降低了厚壁菌门的相对丰度,增加了拟杆菌门的相对丰度,拟杆菌菌群与厚壁菌群的比例增加。(3)灌胃壶瓶碎米荠多糖和二甲双胍改善了血糖、CRE、HDL-C、BUN、肝脏与体重比值。灌胃二甲双胍和多糖后Ⅱ型糖尿病小鼠在Oscillibacter、Roseburia、Marvinbryantia、Blautia、Candidatus_Arthromitus属水平上含量相比TC组下降,而在Lactobacillus、Ruminococcaceae_UCG-014、Anaerotruncus、Parabacteroide、Anaerovorax、uncultured_bacterium_f_Erysipelotrichaceae属水平上含量相比TC组上升,含量接近ZC组。糖尿病小鼠与正常小鼠相比血浆中正常生理代谢受到严重干扰,代谢物质组成发生改变。灌胃二甲双胍和壶瓶碎米荠多糖中剂量能改善糖尿病小鼠中Pyrazine、PC(18:2(9Z,12Z)/18:0)、Isolinderanolid、Cervonyl carnitin、DG(20:4(5Z,8Z,11Z,14Z)/18:2(9Z,12Z)/0:0)、N-Oleoylethanolamin、DG(22:5(7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/18:3(6Z,9Z,12Z)/0:0)这些正离子物质。(4)关联糖尿病对照组与正常组有差异的肠道菌群与代谢物,发现有机酸中的cis-Acetylacrylate会抑制消化球菌属、Ruminococcaceae_UCG-014属。生物碱中的1-甲基-1,2,5,6-四氢烟酸乙酯(Homoarecoline)会抑制克雷伯氏菌属、uncultured_bacterium_f_Rs-E47_termite_group属生长。磷脂酰胆碱类的PC(18:1(11Z)/14:0)会抑制乳球菌属和包含许多有害菌的Escherichia-Shigella属。甘油磷脂类中的PC(20:3(8Z,11Z,14Z)/14:0)会促进克雷伯氏菌属、Ruminococcaceae_UCG-014属,抑制uncultured_bacterium_o_Mollicutes_RF39属。甘油磷脂类的PI(18:1(11Z)/18:3(6Z,9Z,12Z))会促进消化球菌属,抑制Candidatus_Soleaferrea属。结论:(1)超声提取提高了壶瓶碎米荠多糖的提取量,改变了多糖的微观结构,有利于色素的去除。(2)壶瓶碎米荠多糖改变了正常小鼠肠道内容物菌群结构。(3)壶瓶碎米荠多糖对T2DM小鼠的血糖值、CRE、HDL-C、BUN、肝脏与体重比值、肠道微生物、血浆代谢物质有改善作用。
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