【摘 要】
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目的:对万年蒿活性部位的提取纯化方法进行研究,测定活性部位中总黄酮及总香豆素的含量。对万年蒿活性部位中的化学成分进行分离,并测定其中三种化合物的含量,为万年蒿新药的开发打下坚实的基础。方法:1.利用水和乙醇两种不同的溶剂对万年蒿进行提取,通过大孔吸附树脂柱层析法、有机溶剂萃取法、水提醇沉等方法对万年蒿的提取物进行纯化。2.利用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,测定万年蒿的各个提取纯化部分中总黄酮的含
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目的:对万年蒿活性部位的提取纯化方法进行研究,测定活性部位中总黄酮及总香豆素的含量。对万年蒿活性部位中的化学成分进行分离,并测定其中三种化合物的含量,为万年蒿新药的开发打下坚实的基础。方法:1.利用水和乙醇两种不同的溶剂对万年蒿进行提取,通过大孔吸附树脂柱层析法、有机溶剂萃取法、水提醇沉等方法对万年蒿的提取物进行纯化。2.利用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,测定万年蒿的各个提取纯化部分中总黄酮的含量,并确定活性部位以进行后续研究;以东莨菪亭为对照品,测定活性部位中总香豆素的含量。3.应用制备型高效液相色谱法、正反相硅胶柱层析法等对万年蒿活性部位中的化学成分进一步分离,并结合1H-NMR、13C-NMR鉴定所得化合物的化学结构。4.采用高效液相色谱法,选择ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.3%磷酸水为流动相,检测波长为360 nm,柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,建立万年蒿活性部位中三种化合物的含量测定方法。结论:1.提取万年蒿时,水提法得到的提取物中总黄酮的含量为16.8%,醇提法得到的提取物中总黄酮的含量为14.4%,水提法相较于醇提法,得到的提取物中总黄酮的含量较高,所以确定采用水作为提取万年蒿的溶媒。2.大孔吸附树脂柱层析法分离纯化万年蒿的水提物,其50%乙醇洗脱物的总黄酮含量达到了36.4%,选择该部分作为万年蒿的活性部位,并测得该活性部位中总香豆素的含量为15.9%。3.通过高压制备液相和正反相硅胶柱层析法,从万年蒿的活性部位中,分离得到两个香豆素类化合物,分别为东莨菪苷和东莨菪亭。4.利用HPLC法测定万年蒿的水提物经大孔吸附树脂分离纯化的50%乙醇洗脱部分,即活性部位中三种化合物的含量,其中,东莨菪苷的含量为13.14mg/g,东莨菪亭的含量为 15.07 mg/g,芦丁的含量为 2.27 mg/g。
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