两株东乡野生稻内生真菌的鉴定及次生代谢产物的研究

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东乡野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是迄今所发现的世界上分布最北的野生稻,具有耐寒、抗旱、耐贫瘠、抗病虫害等优良品质,是十分重要的资源。植物内生真菌(Endophytic fungi)是指在其生活史中部分或者全部时期生活在健康植物体内,而不会引起宿主植物产生明显病害症状的真菌。由于植物内生真菌多样性丰富,成为结构新颖和生物活性多样的先导化合物的重要来源。本实验室前期研究了东乡野生稻内生真菌多样性,并分离获得大量的东乡野生稻内生真菌菌株。本研究选取了两株内生真菌L99和R57,开展了其分类鉴定以及次生代谢产物分离的研究,希望从中发现具有抗菌或抗癌活性的先导化合物。采用传统形态学结合分子生物学的方法,对内生真菌L99和R57进行分类鉴定。基于ITS rDNA构建的系统发育树显示,菌株L99、菌株R57分别与Sarocladium oryzae、Eupenicillium javanicum聚为一支;结合菌株L99和R57在不同培养基上的形态学特征,最终将菌株L99鉴定为Sarocladium oryzae L99,将菌株R57鉴定为Eupenicillium javanicum R57。采用常规的硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析以及高效液相色谱等分离手段,从菌株L99共分离鉴定了5个化合物,分别为:邻苯二甲酸二-(2-乙基)己酯(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、烟曲霉酸(3)、6β,16β-Diacetoxy-25-hydroxy-3,7-dioxo-29-nordammara-1,17(20)-dien-21,24-lactone(4)、16β-acetoxy-25-hydroxy-3,7-dioxo-29-nordammara-1,17(20)-dien-21,24-lactone(5),其中化合物5为新化合物;从菌株R57中分离鉴定了4个化合物,分别为:邻苯二甲酸二-(2-乙基)己酯(1)、1-十九碳烯(6)、酒石酸内脂(7)和二十四烷酸甲酯(8)。同时对化合物1-8进行了抗菌活性评价。
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