乙醇对大鼠卵巢及其颗粒细胞凋亡的影响

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酒精是常见的致畸物质,有很强的细胞毒作用,能够诱导多种细胞的凋亡。长期过量饮酒会严重损伤人类的生殖系统,对生殖细胞有明显损伤作用。有报道酒精对卵巢有毒性作用,长期酗酒的女性会发生卵巢功能障碍。卵泡闭锁是颗粒细胞凋亡严重后的一种外部表现,近年研究表明,无论是正常还是某些病理状态下的卵巢发育障碍都有颗粒细胞凋亡的参与。目前国内外对乙醇诱导的卵巢颗粒细胞凋亡的研究较少。本实验用40%乙醇给大鼠灌胃,同时用含乙醇的DMEM培养液培养卵巢颗粒细胞,观察乙醇对卵巢及其颗粒细胞的影响,并采用TUNEL染色,流式细胞仪检测及RT-PCR的方法,对颗粒细胞的形态变化,凋亡比率及凋亡基因的表达进行了研究。目的是探索酒精对卵巢的损伤规律及其机制,从而对今后指导优生提供预防和保健的依据。结果表明:随着乙醇灌胃剂量的增加和灌胃时间的延长,卵巢细胞凋亡的程度逐渐加深,表现在乙醇灌胃组与对照组相比,轻度凋亡和重度凋亡有腔卵泡和黄体的比例显著升高,健康卵泡比例显著降低:从乙醇体外培养的颗粒细胞TUNEL染色结果可以看到明显的细胞凋亡的形态学特征;流式细胞仪检测结果显示,乙醇体外培养的颗粒细胞凋亡比率在一定浓度和时间范围内随乙醇浓度的增加和处理时间的延长而有所增加,并可见明显的亚二倍体凋亡峰;Fas和FasL基因的mRNA在颗粒细胞中均有表达,且随乙醇处理浓度和时间的增加表达有增强的趋势,而Bcl-2基因mRNA的表达逐渐减弱;Bax基因也均有表达,但乙醇处理前后表达无明显变化。说明Fas,FasL,Bcl-2基因在颗粒细胞凋亡过程中起到了一定的调节作用。结果提示乙醇可以引起卵巢细胞凋亡的发生。提醒人们节制饮酒,对人类的生殖及健康有重要的现实意义。
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