实验通过重组表达的方法获得具有免疫原性及活性的重组乳酸乳球菌NZ9000。根据乳酸菌表达载体pNZ8148序列的多克隆位点，参照GenBank（EU477374），利用Primer5软件设计了一对扩增BSH酶编码区序列的特异性引物；采用PCR技术扩增L.plantarumM1-UVS29的BSH基因，插入到乳酸菌表达载体pNZ8148中，构建重组表达载体pNZ8148-BSH。将该载体电转化到乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000细胞中。加入诱导剂（nisin）进行目的基因诱导表达；电洗脱法纯化表达蛋白；表达蛋白进行SDS-PAGE电泳分析及Western-blotting鉴定BSH免疫原性。最终根据BSH理化性质确定其活性。本研究克隆了L.plantarum M1-UVS29的BSH基因，成功构建携带BSH基因的重组原核表达质粒pNZ8148-BSH。将pNZ8148-BSH电转化Lactococcus lactis NZ9000后用DNA Star软件分析表明由其编码的氨基酸序列与已知序列同源性为100%，获得了稳定表达pNZ8148-BSH的乳酸乳球菌原核表达体系。nisin30℃诱导3h，BSH在Lactococcus lactisNZ9000中获得高效表达。电洗脱纯化后，蛋白纯度高达90%。SDS-PAGE检测，在相对分子质量约37kDa处可见目的蛋白表达条带，与预期结果一致。Western-blotting鉴定结果表明，表达产物可与植物乳杆菌多克隆抗体发生特异性反应，具有良好的免疫原性。根据BSH的理化性质测定表达蛋白的活性为0.77umol. min-1，这为进一步研究BSH基因工程乳酸菌以及降胆固醇食品及微生态制剂的开发奠定基础。