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目的：建立一种快速检测临床标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的诊断方法及探讨siRNA抑制MRSA耐药基因mecRI的表达对MRSA耐药性的影响。 方法:利用免疫磁珠分离技术特异性富集金黄色葡萄球菌，联合多重PCR技术（mecA+femA+IS431）直接检测临床标本中MRSA；400份各类临床标本同时用五种方法检测，并以常规细菌培养＋PBP2a胶乳凝聚法检测结果为金标准，评价Vitek－32全自动微生物分析仪法、MRSA显色培养基法、直接多重PCR检测法、免疫富集联合多重PCR检测的敏感性、特异性；设计、合成特异性针对耐药基因mecRI mRNA的siRNA，将不同剂量siRNA导入MRSA，通过在含苯唑西林的MH平板上MRSA生长情况来评价siRNA抑制MRSA耐药基因表达对细菌耐药性的影响。结果：新建的免疫富集联合多重PCR法，最低检测MRSA浓度1×102CFU/ml，试验时间缩短为6h；细菌培养＋PBP2a胶乳凝集法为对照，Vitek－32全自动微生物分析仪法、MRSA显色培养基法、免疫富集联合多重PCR检测法、直接采用多重PCR检测法的敏感性分别为100％、96.7%、100%、26.7%，特异性分别为98.4%、100%、97.0%、100%；细菌培养＋胶乳凝集法和免疫富集联合多重PCR快速检测法检测MRSA结果比较，两种方法检测MRSA的结果差异有显著(P<0.05)。通过siRNA导入MRSA后，对含苯唑西林的MH平板上生长后的菌落计数进行比较，各剂量组中每对siRNA和其相应的对照组细菌计数无显著性差异（P>0.05）。结论：新建的免疫富集联合多重PCR法灵敏度高、特异性强、简单快速，适用于直接快速检测临床标本中的MRSA，该方法对及早发现MRSA携带者、诊断MRSA感染病人有重要的意义；在本试验的条件下，siRNA不能有效地通过抑制mecRI mRNA的表达来逆转细菌耐药性。