【摘 要】
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目的:白内障是一种多因素疾病,除了遗传因素这外,其发病和发展还与年龄、性别、放射(可见光,紫外线,X线等)、氧化、物理损伤、饮食和用药等因素有关,这些因素可以导致基因表
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目的:白内障是一种多因素疾病,除了遗传因素这外,其发病和发展还与年龄、性别、放射(可见光,紫外线,X线等)、氧化、物理损伤、饮食和用药等因素有关,这些因素可以导致基因表达的异常而影响晶状体的透明度,最终形成白内障.该研究应用mRNA差异显示法比较不同类型白内障患者晶状体上皮细胞基因表达与正常人的差异,寻找白内障的致病基因和抗病基因,以探讨白内障发病的分子机制.而警备高质量的人类晶状体上皮细胞总协调性和非协调性异种移植实验RNA是完成差异显示法的前提条件.组织标本少,细胞RNA含量低,决定必须建立一套提取小于50mg的少量眼部组织(尤其是晶状体前囊膜)总RNA的方法,并将该方法应用到后面的差异显示实验中.结论:1、提取少量组织和细胞总RNA时Trizol中添加糖原至终浓度为0.1μg/μl,可以明显提高产量,不影响RNA的完整性和逆转录酶及Taq酶的活性,可以应用于该研究第二部分差异显示和验证步骤中晶状体囊膜总RNA的提取.2、该研究发现26个各类型白内障与正常人晶状体上皮细胞差异表达的基因.3、已经获得9个差异基因的序列并检索到7个与之高同源性的基因.4、IGFBP-5定位于细胞外基质,促进细胞有丝分裂,在儿童水平较低,但在先天性白内障中异常高表达,有可能参与与先天性白内障的形成;lamp-2是溶酶体膜的重要成分,在老年性白内障中高表达,提示细胞受环境因损害导致异常衰老、死亡而刺激邻近细胞溶酶体系吞噬泡的形成.5、发现一个差异基因未见报导,可能是个新基因.
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