多/泛耐药鲍曼不动杆菌耐药机制研究和同源性分析

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目的:了解皖北地区多耐药甚至泛耐药鲍曼不动杆菌临床分布特征和对包括替加环素、多粘菌素E和利福平在内的19种抗菌药物的耐药特性,为临床合理应用抗生素提供实验室依据。检测本组多/泛耐药鲍曼不动杆菌的D类碳青霉烯酶和整合酶基因,探讨其在介导多/泛耐药性中的作用。分析本组多/泛耐药鲍曼不动杆菌的同源性,为多/泛耐药鲍曼不动杆菌的院内感染防控提供理论依据。方法:1.收集皖北地区三家医院72株鲍曼不动杆菌,用法国生物梅里埃公司生产的VITEK-32细菌鉴定系统的G-杆菌鉴定卡(GNI卡)将细菌鉴定到种;采用GNS-148药敏试验卡进行16种临床常用抗生素药敏试验,测定各种抗生素最低抑菌浓度(MIC);用肉汤稀释法进行替加环素、多粘菌素E和利福平的药物敏感性试验,测定各抗生素的MIC值。2.用聚合酶链式反应(PCR)扩增D类碳青霉烯酶基因(OXA-51、OXA-23、OXA-24、OXA-58)和Ⅰ—Ⅲ类整合子的整合酶基因。3.应用重复外基因回文结构PCR(REP-PCR)分析细菌的同源性。结果:1.临床分布特征:72株临床分离的鲍曼不动杆菌中,有75%(54/72)为多重耐药菌株,25%(18/72)是泛耐药菌株。多/泛耐药鲍曼不动杆菌主要科室分布为ICU,构成比是62.50%。呼吸道是感染发生的主要部位(构成比为86.11%)。2.细菌药物敏感性实验结果:替加环素、多粘菌素E、利福平体外药敏试验耐药率较低,分别是5.56%、6.94%、16.67%。临床常用16种抗生素中除头孢哌酮/舒巴坦(舒普深)耐药率为41.67%外,其他抗生素耐药率较高。碳青霉烯类耐药率较高,亚胺培南76.39%,美罗培南77.78%,其他10种抗生素耐药率接近100%。另外,通过本实验发现一例对亚胺培南敏感但对美罗培南耐药菌株。3. D类碳青霉烯酶基因检测结果显示:72例标本中仅11株不表达OXA-23碳青霉烯酶基因,其阳性率84.72%;OXA-51碳青霉烯酶基因阳性率100.00%;OXA-24、OXA-58碳青霉烯酶基因未检测到。4.整合子检测结果显示:72例标本中共6株不表达Ⅰ类整合子的整合酶基因intI-1,其阳性率91.67%,Ⅱ、Ⅲ类整合子的整合酶基因intI-2、 intI-3未检测到。5.细菌同源性分析结果显示:淮北市人民医院标本为同一克隆菌株,提示当时可能存在院内爆发流行;蚌埠医学院第一附属医院标本则为3株流行菌株的院内流行播散;蚌埠医学院第三附属医院标本条带分析结果显示为2个不同菌株流行播散,但有8株细菌条带不清晰,尚不能判断是否只有2个不同菌株的院内播散。未发现三家医院之间耐药菌株的克隆传播。结论:1.临床分离的鲍曼不动杆菌在本研究中已呈现对多种抗生素耐药,甚至出现多个“泛耐药”菌株。多/泛耐药鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素耐药形式严峻,头孢哌酮/舒巴坦在目前临床应用药物中的敏感性最高,提示头孢哌酮/舒巴坦可慎重作为本地区治疗多/泛耐药鲍曼不动杆菌的经验用药。替加环素、多粘菌素E和利福平对多/泛耐药鲍曼不动杆菌体外敏感性较好。2.72株多/泛耐药鲍曼不动杆菌的OXA-23检出阳性率较高,但与碳青霉烯类耐药菌株间无严格的一一对应关系,提示存在其他耐药机制共同参与其对碳青霉烯类耐药。3.Ⅰ类整合子携带率明显高于目前文献报道,推测Ⅰ类整合子阳性与细菌多/泛耐药有关。4.多/泛耐药鲍曼不动杆菌院内感染播散形势严峻,存在同一株或几株克隆菌株的院内爆发流行,临床应加强院内感染控制措施。
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